【摘 要】
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目的：明确肺腺癌A549细胞中节律基因hPer1表达的节律性,探究hPER1对A549细胞增殖和低剂量放射超敏感性的影响.方法：1.TPA诱导体外培养A549细胞的节律基因表达,通过荧光定量
【机 构】
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云南省肿瘤医院/昆明医科大学第三附属医院放疗中心,昆明,650118
【出 处】
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第九届泛珠江区域放射肿瘤学学术大会暨肿瘤放射治疗多中心协作研讨会、重庆市医学会放射肿瘤治疗学专业委员会2014年会
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目的：明确肺腺癌A549细胞中节律基因hPer1表达的节律性,探究hPER1对A549细胞增殖和低剂量放射超敏感性的影响.方法：1.TPA诱导体外培养A549细胞的节律基因表达,通过荧光定量PCR和流式细胞术检测48h不同时间点细胞中hPer1的mRNA和蛋白表达；2.构建hPER1干扰质粒pTER/hPer1,并转染入TPA刺激的A549细胞中,检测其干扰效价,筛选出高效率干扰质粒；3.TPA刺激A549细胞后,分别对hPER1表达的峰值、谷值以及hPER1干扰细胞,以不同低剂量x线照射细胞,流式细胞仪对其进行分选计数,克隆形成法检测细胞的存活分数,利用修正的诱导修复模型拟合细胞存活曲线,比较各组之间的差异性.结果：1.A549细胞中节律基因hPer1的mRNA和蛋白表达均呈近日节律变化,周期约为24h,蛋白表达节律位相较mRNA延迟4h；2.干扰质粒pTER/hPer1能有效抑制TPA诱导A549细胞中的hPER1表达；3.不同低剂量照射hPER1表达峰值、谷值、hPER1干扰和母本A549细胞,细胞克隆形成实验显示各组细胞存活率存在差异,特别是hPER1表达峰值细胞存活率明显低于hPER1干扰和对照母本A549细胞.结论：hPer1的mRNA和蛋白均呈近日节律表达,hPER1表达可能会增加A549细胞的低剂量放射超敏感性.
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