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目的:1)本研究通过应用FISH技术检测宫颈癌及宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)者患者治疗前后宫颈(阴道残端)脱落细胞中hTERC、C-MYC基因的表达情况,分析基因扩增在宫颈癌及CIN的表达情况,并与HPV,TCT检测结果相比较,探讨在宫颈癌及CIN治疗后的随访价值及临床意义.2)将hTERC,C-MYC基因检测与HPV检测进行比较,分析hTERC基因及C-MYC基因扩增与不同HPV亚型感染的关系。
方法:研究对象为2010年11月-2012年12月在广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科就诊患者,最终选取经阴道镜下多处病理活检并诊断为宫颈癌及CIN的患者79例,分别如下:其中47例CIN组,包括CINⅠ级8例,CINⅡ级15例、CINⅢ级24例;宫颈癌患者32例;20例正常妇女宫颈作为阴性对照组。以上患者均在初诊时取宫颈脱落细胞标本,分别进行HPV检测、TCT检查、及FISH法检测hTERC、C-MYC基因。CINⅠ级1例行宫颈LEEP术,7例纳入观察;CINⅡ级13例行LEEP术,1例行全子宫切除术,1例未行治疗;CINⅢ级20例行宫颈冷刀锥切术,1例行LEEP术,3例行全子宫切除术;32例宫颈癌患者中,11例行广泛根治手术,余21例行放化疗综合治疗。对以上的病例进行追踪随访6-24个月,取宫颈(或阴道残端)细胞再次进行hTERC、C-MYC基因检测、HPV-DNA检测和TCT检查。必要时在阴道镜检查下病理活检。
结果:1)治疗前hTERC基因、C-MYC基因在不同病理类型中的表达情况:随着组织病理级别的增加,hTERC基因的阳性表达率逐渐升高,各组间差异有统计学意义(P<0.05);C-MYC基因异常扩增的阳性率也逐渐升高,各组间差异有统计学意义(P<0.05);hTERC基因与C-MYC基因相比较,在各病理组别中阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。2)HPV在不同病理类型中及治疗前后的感染情况:随着宫颈组织病理级别的增加,HPV的阳性率也逐渐升高,各组间差异有统计学意义(P<0.05);但在治疗6个月后随访发现HPV持续感染率在CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级及宫颈癌组中分别是33.33%,50.00%,20.00%和17.24%.3)宫颈癌与CIN治疗前后的基因表达情况比较:hTERC基因阳性表达率在治疗后较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);C-MYC基因阳性表达率在治疗后较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,CIN及宫颈癌的C-MYC基因的阳性表达率高于hTERC基因的阳性表达率,差异有显著统计学意义(P<0.05),可能与C-MYC基因属于原癌基因,而hTERC基因属于端粒酶基因有一定的关系。4)基因检测结果与TCT检测结果比较:随着TBS分级的升高,hTERC基因及C-MYC基因的阳性表达率逐级增加,说明hTERC基因及C-MYC基因检测具有一定的临床意义。5)基因检测结果与HPV检测结果比较:hTERC基因、C-MYC基因检测方法的阳性率与HPV检测的阳性率相当,三者的检测结果具有一致性(P>0.05}。6}不同型别的HPV感染,导致hTERC基因、C-MYC基因扩增的情况不同;高危型HPV,尤其是HPV16型感染更易导致hTERC基因、C-MYC基因扩增。7)宫颈癌与CIN治疗前后TCT,HPV检测结果的比较:治疗后TCT及HPV检测结果阳性的构成比都较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。8}四种检测方法对CIN及宫颈癌检出结果比较:在初次检测中,hTERC基因与C-MYC基因检测的灵敏度和特异度均相同,但采用FISH技术对hTERC基因、C-MYC基因检测的特异性均大于TCT与HPV检测,可以与TCT与HPV检测互补。hTERC基因、C-MYC基因综合检测效果均低于TCT与HPV检测;四项检测方法中,从约登指数来看,TCT的诊断准确率最高。9)治疗后四种检测方法与CIN残留及复发的关系:在随诊后,仅TCT检测方法对CIN的残留及复发上有统计学意义(P<0.05),余三种检测方法并无统计学意义(P>0.05)。
结论:1)在治疗前,hTERC基因阳性表达率随着宫颈病变病理级别的增加而升高的趋势,C-MYC基因的阳性表达率也随着宫颈病变的病理级别程度增加而升高;在治疗后,两者的阳性表达率较治疗前均明显下降,但C-MYC基因的阳性表达率比hTERC基因高,可能与C-MYC基因是原癌基因,而hTERC基因是端粒酶基因有关。2)HPV感染的亚型不同,其致病性也不一样,高危型HPV,尤其是HPV16型的感染更容易导致hTERC基因与C-MYC基因的扩增。3)治疗后对CIN患者宫颈或阴道残端的TCT检测,可以预测残留或者复发,是一种有效的随诊方法;疗后HPV持续阳性患者复发的风险增高,随访应密切。而hTERC基因与C-MYC基因检测虽然具有无创性及重复性好等优点,但不建议作为随访的主要检测手段,可以作为TCT,HPV检测的辅助检测方法。