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目的:研制预防IBDV的重组鸡痘病毒活载体疫苗。
方法:将NDV F和HN基因分别插入到病毒转移载体pMTB18的双向启动子的下游,构建鸡痘病毒转移载体pMTB18-F-HN。然后通过脂质体转染法将重组质粒与鸡痘病毒(HPV)284E4株共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),进行同源重组。将收获的病毒通过Brdu连续加压筛选,挑斑纯化病毒后进行PCR、RT-PCR、IFA鉴定,并确定重组病毒的遗传稳定性。
结果:成功构建了转移载体质粒pMTB18-F-HN和重组鸡痘病毒rFPV-FHN。
结论:成功获得了重组鸡痘病毒,遗传稳定性良好。