【摘 要】
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溶菌酶是机体先天免疫系统中一个重要的效应分子,在机体免疫系统中发挥重要作用.本研究根据毕赤酵母(ichia pastoris)的密码子偏爱性,人工合成紫贻贝i型溶菌酶的成熟肽基因(mMgIL),其全长cDNA为393bp,编码131个氨基酸残基.将mMgIL与表达载体pPICZαA连接,构建重组表达载体pPICZαA-mMgIL,电转至毕赤酵母X-33细胞,利用MD、MM和含抗生素zeocin的Y
【机 构】
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上海海洋大学食品学院,上海201306
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溶菌酶是机体先天免疫系统中一个重要的效应分子,在机体免疫系统中发挥重要作用.本研究根据毕赤酵母(ichia pastoris)的密码子偏爱性,人工合成紫贻贝i型溶菌酶的成熟肽基因(mMgIL),其全长cDNA为393bp,编码131个氨基酸残基.将mMgIL与表达载体pPICZαA连接,构建重组表达载体pPICZαA-mMgIL,电转至毕赤酵母X-33细胞,利用MD、MM和含抗生素zeocin的YPD培养基筛选高拷贝阳性转化子.对阳性转化子在29℃、pH6.0条件下进行1.0%甲醇诱导表达96h.SDS-PAGE和Western blot分析显示重组紫贻贝i型溶菌酶在毕赤酵母中成功表达.
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