【摘 要】
：
本试验根据产气荚膜梭菌α、p、β2、ε、v和e毒素基因分别设计合成6对引物,建立PCR检测方法,对江西部分地区56份仔猪腹泻样品进行肠毒素基因检测,结果检测出2份e毒素基因阳性的样品.采用改良D-环丝氨酸培养基对54份e毒素基因阴性的样品进行产气荚膜梭菌分离,得到33株产气荚膜梭菌分离株.然后建立多重PCR(α、β、β2、ε)和I毒素PCR方法对33株分离进行检测,结果有93.9％ (31/33)
【机 构】
：
江西农业大学动科院,江西南昌330045
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十二次全国学术研讨会
论文部分内容阅读
本试验根据产气荚膜梭菌α、p、β2、ε、v和e毒素基因分别设计合成6对引物,建立PCR检测方法,对江西部分地区56份仔猪腹泻样品进行肠毒素基因检测,结果检测出2份e毒素基因阳性的样品.采用改良D-环丝氨酸培养基对54份e毒素基因阴性的样品进行产气荚膜梭菌分离,得到33株产气荚膜梭菌分离株.然后建立多重PCR(α、β、β2、ε)和I毒素PCR方法对33株分离进行检测,结果有93.9％ (31/33)菌株属于A型且携带beta2毒素.所扩增的beta2毒素与e毒素片段大小分别为566bp、516bp,与预期相一致；目的片段经克隆测序后,与产气荚膜梭菌参考株beta2毒素与e毒素基因序列的核苷酸同源性分别为99％～100％、98％～100％,所分离菌株t毒素基因PCR检测均为阴性.
其他文献
研究獭兔腹泻发生后盲肠菌群结构的变化情况,为微生态防治断兔奶腹泻提供理论基础.分别提取5只健康和腹泻獭兔盲肠内容物总DNA,应用PCR-DGGE及Real-Time PCR技术比较分析獭兔盲肠中菌群结构的差异.腹泻獭兔PCR-DGGE图谱条带丰富度、均匀度、多样性指数与健康獭兔相比差异均不显著,但聚类分析和主成分分析(PCA)能够将腹泻组和健康组区分开.Real-Time PCR检测显示,腹泻獭兔
生物气溶胶是是气溶胶的一种主要组成部分.它包括细菌、真菌、病毒、尘螨、花粉、孢子及其它一些微生物粒子和动物的一些代谢产物(胡家骏,1988；章澄昌,1995).生物气溶胶在空气中的传播可以导致人和动物的很多疾病(Spendtove,J.C.,1974；胡庆轩,1988；张劲松,1990；Lighthart,B.,1994),比如一些呼吸道疾病,包括：哮喘、鼻炎、遗传性过敏症、慢性支气管炎、皮肤过敏
为了构建HA2-基因的新功能型重组乳酸菌并检测其表达产物的免疫原性,本实验通过PCR将来源于禽流感病毒的血凝素基因HA2插入锚定表达载体pSIP-409-pgsA中,构建重组质粒pSIP-409-pgsA-HA2,并将其电转到植物乳杆菌NC8中,通过Western-blot检测目的蛋白的表达情况。结果表明：pSIP-409-pgsA-HA2蛋白成功表达,并且具有反应原性,为后期实验奠定了基础。
RAG-1和RAG-2基因是未成熟B细胞和T细胞分化所必须的，且只在初级淋巴器官中表达，而不在成熟细胞中表达，这个特征使RAG-1或RAG-2成为研究这些器官发育的一个实用的指标。然而，目前市场上人和兔的RAG蛋白的特异性抗体己经出现，但针对猪的RAG蛋白特异性抗体至今没有出现，这给检测猪的肠道相关组织是不是B细胞的发育位点带来了一定的困难。所以本试验，通过合成猪的RAG2基因序列，然后将其克隆到
为了构建S-DCpep融合基因重组乳酸菌和检测其基因表达产物的免疫原性，根据猪流行性腹泻病毒S基因序列，合成S-DCpep基因融合.将目的基因克隆至片段亚克隆至大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体pSIP409中，电转化入植物乳杆菌NC8(Lb.plantarum NC8)，经SppIP诱导和Western-blot分析.结果显示，重组菌NC8/pSIP409-S-DCpep的裂解物中出现大小约为80ku
为探讨干酪乳杆菌对动物细菌性肠炎的作用机制,18只Balb/c小鼠被随机分成3组,肠炎组：用2.0×108 cfu/ml的ETEC K88 0.2 ml连续灌胃3 d；干预组：用2.0× 108cfu/mL的L.casei给鼠连续灌胃7d,然后用2.0× 108 cfu/ml的ETEC K88 0.2 ml连续灌胃3 d；对照组,用生理盐水灌胃3d.利用ELISA方法检测不同处理组小鼠外周血和十二
单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)作为四大重要食源性病原菌之一,对人类及多种畜禽健康威胁极大.LM细胞胞壁表面分布多种毒力蛋白,在感染机体过程中发挥重要作用,其中有一类至关重要的表面蛋白其C末端含有保守基序LPXTG,分选酶A能够识别基序LPXTG,共价结合到肽聚糖上,呈现在细胞表面发挥毒力作用.本实验以不同食品中分离得到的24株单增李斯特菌为实验对象,设
为了更好地了解宿主机体对禽流感病毒感染后的免疫反应,本实验以TC-1细胞为模型,感染H9N2亚型禽流感病毒。通过荧光定量PCR(qRT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法检测了3种模式识别受体(TLR-3、RIG-Ⅰ和MDA-5)和5种炎性细胞因子(IL-6、RANTES、IP-10、TNF-α和 IFN-β)。结果显示：3种模式识别受体中MDA-5上调最为明显,5种炎性因子中RANT
沙门氏菌是重要的肠道病原菌,其主要临床症状是肠胃炎和伤寒症.非伤寒型沙门氏菌(Salmonella Typhimurium,S.Typhimurium)主要引起食物源疾病,可造成较高的发病率和死亡率.抗菌肽apidaecin是从蜜蜂淋巴液中分离得到的小肽.AP2是apidaecin 1b (AP 1b)N端的GNN突变成RVR后的改良肽,AP2具有比AP 1b更高效的抑制革兰氏阴性菌活性,且具有耐
H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 AIV)是一种低致病性禽流感病毒,其临床症状表现温和,易继发细菌感染和支原体感染,对我国畜牧业造成严重的经济损失.本研究通过Illumina Hiseq 2000测序技术和实时荧光定量PCR(qPCR)的方法研究H9N2AIV感染后肉鸡肠道菌群结构及其肠道粘膜组织紧密连接的变化,为H9N2 AIV继发感染的防控提供理论指导,为进一步研发抗流感病毒的微生态制剂提供理