【摘 要】
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本研究采用传统的细胞遗传学方法,通过从小鼠见栓3.5后获得的囊胚中制备染色体,研究适合小鼠囊胚染色体制备的方法.将小鼠受精后3.5天的胚胎取出在KSOM中培养2h后分别在含有0
【机 构】
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保定河北农业大学动物科技学院,河北省牛羊胚胎工程技术研究中心
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会
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本研究采用传统的细胞遗传学方法,通过从小鼠见栓3.5后获得的囊胚中制备染色体,研究适合小鼠囊胚染色体制备的方法.将小鼠受精后3.5天的胚胎取出在KSOM中培养2h后分别在含有0.05μg/ml,0.1μg/ml,0.2μg/ml秋水仙素的KSOM培养基中阻断培养2h～4h,以抑制细胞分裂停留在中期.阻断培养后的胚胎去除透明带后移入0.56％(质量分数)的KCL的低渗液中,37℃低渗15min～20min.低渗后的胚胎移至载玻片上,经固定液Ⅰ和固定液Ⅱ固定后室温下用体积分数为25％的Giemsa染色液染色1h,蒸馏水冲洗,室温干燥,显微镜下观察胚胎细胞的染色体分布,结果表明用含有0.1μg/ml秋水仙素的培养基处理4h,取出透明带后低渗15min的染色体制备效果较为理想.
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