【摘 要】
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目的：为放射增敏药物和辐射防护药物研发,以及放射生物学基础研究提供新的研究工具,建立两株人类耐辐射细胞模型.方法：将人类乳腺癌细胞MCF-7和人类宫颈癌细胞HeLa暴露于3G
【机 构】
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苏州大学医学部放射医学与公共卫生学院,江苏 苏州 215123
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目的：为放射增敏药物和辐射防护药物研发,以及放射生物学基础研究提供新的研究工具,建立两株人类耐辐射细胞模型.方法：将人类乳腺癌细胞MCF-7和人类宫颈癌细胞HeLa暴露于3Gy 60Coγ-射线,将存活的细胞继续传代培养至对数期,再次给予3Gy 60Co射线照射.经过多次照射,3Gy的60Coγ射线对细胞已不具有杀伤作用时,增加照射剂量至6Gy并重复以上过程.持续增加单次照射剂量至30Gy时,比对具有辐射抗性的MCF-7和Hela细胞(以下简称MCF-7-R和HeLa-R)与普通的MCF-7和HeLa细胞的生物学特性.采用普通光学显微镜观察比较细胞形态的改变；通过MTT法检测细胞对烷化剂甲基磺酸和H2O2损伤作用的反应性；采用克隆形成实验检测细胞对电离辐射的敏感性；通过Westem Blot法检测相关蛋白的表达.结果：光学显微镜下MCF-7和HeLa细胞大小、形状比较均一,细胞边界清楚,细胞核呈规则的圆形或椭圆形；而MCF-7-R和Hela-R细胞大小不一、形状各异,细胞边界模糊,细胞核胀大不规则,悬浮细胞和细胞碎片明显增多.MTT结果显示在不同浓度的MMS和H2O2作用下,MCF-7-R和HeLa-R细胞的存活率显著高于MCF-7和HeLa细胞(p＜0.05).克隆形成实验证明在不同剂量的60Coγ-射线作用下,MCF-7-R和HeLa-R细胞的存活分数显著高于MCF-7和HeLa细胞(p＜0.05).Westem Blot检测结果发现,抗辐射细胞中与DNA损伤及修复相关蛋白ATM、CSB、FEN-1、Ku70、Ku-86、MGMT、MRE11、Rad51、XRCC1、XRCC3和XRS2等的表达量都发生不同程度的变化.结论：成功建立耐辐射人类细胞模型MCF-7-R和HeLa-R细胞,对其进一步的深入研究将为放射生物学基础和应用研究提供新的、有利的研究工具.
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