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目的：建立一种简单、快速、灵敏的液-质联用法(LC-MS/MS)，同时测定大鼠血浆中水飞蓟宾A与水飞蓟宾B浓度。方法：0.1 mL血浆样品经沉淀蛋白预处理后，以甲醇-0.1％甲酸(48:52，v/v)为流动相，采用Zorbax Eclipse XDB-C18 色谱柱(150×2.1 mm，5μm)分离，以ESI源负离子模式、选择反应监测(SRM)方式进行定量分析。结果：水飞蓟宾A与水飞蓟宾B在血浆中的线性范围为2.0～50000 ng·mL-1，最低定量限(LLOQ)为2.0 ng·mL-1。药物的日内、日间精密度在9.1％以内，准确度(相对误差)小于±5.7％。结论：本方法成功地用于水飞蓟宾A与水飞蓟宾B各自的药动学及生物利用度研究。