【摘 要】
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文章旨在筛选高产脂肪酶能力的细菌,并对其脂肪酶A基因进行克隆测序分析。采用含有维多利亚蓝的分离培养基平板从富油脂的土壤中分离到筛选得到相对高产的脂肪酶细菌,利用碱
【机 构】
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四川农业大学动物微生态研究中心; 西南医科大学; 德阳市畜牧食品局; 成都农业科技职业学院;
【基金项目】
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“教育部长江学者和创新团队发展计划”创新团队资助项目(IRT0848);四川省高等学校科技创新团队资助项目(动物源性食品安全创新团队,KM406183.1)
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文章旨在筛选高产脂肪酶能力的细菌,并对其脂肪酶A基因进行克隆测序分析。采用含有维多利亚蓝的分离培养基平板从富油脂的土壤中分离到筛选得到相对高产的脂肪酶细菌,利用碱滴定法测定其酶活力大小,通过细菌形态、生理生化和细菌16S rRNA序列分析;设计脂肪酶基因引物并对脂肪酶LipA基因进行克隆测序分析。结果,筛选得到1株产脂肪酶能力相对较高的细菌A05,利用碱滴定法测定其酶活力大小为1.07 U/ml通过细菌形态、生理生化和16S rRNA序列鉴定该高产脂肪酶细菌为铜绿假单胞菌;根据GenBank中报道的铜绿假单胞菌脂肪酶A基因设计引物,成功扩增得到长1094bp的酶基因DNA序列,该序列与铜绿假单胞菌脂肪酶A基因序列同源性高达98%以上,该序列包含1个完整的开放阅读框,936bp,共编码311个氨基酸,前26个氨基酸残基组成信号肽和后285个氨基酸残基组成成熟肽。
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