【摘 要】
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为培育新型花色的山茶花,研究了从金花茶花瓣中克隆出来的黄酮醇合成酶基因CnFLS对烟草花色的调控效应.利用CnFLS基因的正义表达载体与干扰表达载体,通过农杆菌介导法分别将CnFLS 正义表达基因与干扰基因转入模式植物烟草.通过超霉素抗性筛选,获得了50 株转CnFLS 正义表达基因烟草植株和40 株转CnFLS 干扰表达基因烟草植株.PCR 鉴定及southern 杂交鉴定表明CnFLS 正义表
【机 构】
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中国林科院亚热带林业研究所,浙江富阳 311400
【出 处】
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中国林学会经济林分会2012年学术年会
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为培育新型花色的山茶花,研究了从金花茶花瓣中克隆出来的黄酮醇合成酶基因CnFLS对烟草花色的调控效应.利用CnFLS基因的正义表达载体与干扰表达载体,通过农杆菌介导法分别将CnFLS 正义表达基因与干扰基因转入模式植物烟草.通过超霉素抗性筛选,获得了50 株转CnFLS 正义表达基因烟草植株和40 株转CnFLS 干扰表达基因烟草植株.PCR 鉴定及southern 杂交鉴定表明CnFLS 正义表达基因与CnFLS 干扰表达基因成功整合在烟草的基因组中.其中,3个CnFLS 正义表达基因阳性株系TF1,TF4,TF31 与3个转CnFLS 干扰基因株系Tf1,Tf23,Tf35 为单拷贝插入.实时荧光定量PCR 结果显示在TF1,TF4,TF31 株系中,CnFLS基因表达量显著升高；在Tf1,Tf23,Tf35 株系中CnFLS基因表达量显著降低.与对照植株的粉红色花色相比,转CnFLS 正义表达基因烟草株系TF1,TF4,TF31 的花色呈现出白色至淡黄色,而转CnFLS 干扰表达基因烟草株系Tf1,Tf23,Tf35 的花色则变为深红色.HPLC 分析结果显示,转CnFLS 正义表达基因阳性株系TF1,TF4,TF31 的花瓣中,其主要色素成分花青素-3-O-鼠李糖苷(Cy3R)的含量显著降低,槲皮素(Qu)、槲皮素-3-O-葡糖苷(Qu3G)、槲皮素-7-O-葡糖苷(Qu7G)的含量则显著升高；而转CnFLS 干扰基因株系Tf1,Tf23,Tf35花瓣中Cy3R 的含量显著增加,Qu3G、Qu7G 的含量则显著降低.这些研究结果表明,CnFLS基因在花色的形成中具有重要作用.该基因可以被用来加深或减淡转基因植株的花色,从而培育具有新型花色的观赏植物.
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