【摘 要】
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目的:检测人源肥大细胞系LAD-2细胞的组胺释放能力,为体外评价蛋白质的过敏原性提供体外实验模型.方法:体外培养LAD-2细胞增长至密度约为1×106个/mL,甲苯胺蓝染色后在光镜
【机 构】
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广州医科大学附属第二医院变态反应国家临床重点专科广东省过敏反应与免疫重点实验室/呼吸疾病国家重点实验室变态反应研究室,广东广州510260
【出 处】
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2016年广州市医学会耳鼻咽喉科学分会学术年会
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目的:检测人源肥大细胞系LAD-2细胞的组胺释放能力,为体外评价蛋白质的过敏原性提供体外实验模型.方法:体外培养LAD-2细胞增长至密度约为1×106个/mL,甲苯胺蓝染色后在光镜下观察细胞形态.利用Western Blot技术检测LAD-2细胞表面FcεRⅠ受体的表达水平,用浓度为0.5 μmol/L、5 μmol/L、20 μmol/L钙离子载体及3%Triton刺激LAD-2细胞,使用组胺仪Histareader501检测组胺释放量.结果:细胞染色后光镜下观察细胞内含有紫红色颗粒;经Western Blot鉴定,LAD-2细胞表面有FcεRⅠ受体表达,钙离子载体成功刺激LAD-2细胞组胺释放,浓度为0.5μmol/L、5 μ mol/L、20μ mol/L时,组胺释放量分别为总组胺释放量的48.3%、34.8%、38.6%;.结论:LAD-2细胞内含有异染颗粒,而且细胞表面表达有FcεRⅠ受体,用钙离子载体刺激细胞能成功诱导组胺释放.LAD-2细胞是体外评价蛋白质过敏原性的理想模型.
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