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目的:构建双基因共表达腺病毒载体(Ad-DCX-SPARC),研究其对胶质瘤细胞的生长、侵袭和辐射敏感性的影响。方法 :PCR扩增获得DCX和SPARC目的基因,构建针对DCX和SPARC的p Ad Track-CMV-DCX-poly A+promoter-SPARC双基因共表达重组转移质粒,得到的同源重组质粒p Ad Easy-1-p Ad Track-CMV-DCX-poly A+promoter-SPARC,经Pac I酶切后再用脂质体转染QBI-293A细胞,获得双基因共表达重组腺病毒载体。将Ad-DCX-SPARC重组腺病毒体外感染胶质瘤细胞U251和A172,筛选出Ad-DCX-SPARC的最佳感染剂量。结果成功构建了双启动子介导的DCX和SPARC双基因共表达腺病毒载体Ad-DCX-SPARC。获得最佳感染剂量分别为20MOI和100MOI。腺病毒介导的DCX和SPARC双基因共表达在体外能明显抑制胶质瘤细胞的生长,联合X射线照射后能抑制胶质瘤细胞的克隆形成提高了胶质瘤细胞的辐射敏感性,并且能减少照后停滞在G2期的细胞,最终促进胶质瘤细胞的死亡。此外,单纯增加DCX和SPARC双基因共表达对胶质瘤细胞凋亡无明显影响,但联合辐照后能明显促进胶质瘤细胞的凋亡,能明显上调U251和A172胶质瘤细胞bax,bad和bcl-2的表达下调。结论本研究成功获得了DCX和SPARC双基因共表达腺病毒载体Ad-DCX-SPARC,能明显抑制胶质瘤细胞的生长,减弱SPARC促胶质瘤侵袭的作用。研究发现,增加DCX和SPARC双基因共表达提高了脑胶质瘤的辐射敏感性。DCX和SPARC双基因共表达联合X射线照射抑制了胶质瘤细胞的克隆形成,提高了照射前G2期细胞阻滞,增加辐照引起的细胞凋亡、使细胞照后G2期的阻滞得到减弱可能是引起脑胶质瘤辐射敏感性增加的原因所在。Ad-DCX-SPARC联合X射线照射可通过调节U251和A172细胞中bax,bad和bcl-2等细胞凋亡相关基因诱导胶质瘤细胞的凋亡。