目的：建立新城疫与禽流感通用型、高致病型(H5亚型、H9亚型)的荧光PCR快速同步鉴别检测方法,并对检测试剂的灵敏度及特异性作了初步的临床评估,探讨了该试剂在临床应用上的可行性。 方法：分析考察NDV、AIV及HPAIV的基因变异概况,以国内主要流行株为重点、针对基因库里所有特异的核酸序列最大可能的保守性,设计引物与TaqMan探针,采用一步法RT-PCR的方法,以相同的核酸提取手段---负压柱核酸提取纯化法、相同的RT-PCR条件同步扩增检测标本中NDV、AIV核酸,并可同时获知H5、H9感染的情况。 结果：试验所建立的方法与鸡胚培养试验相比,具有相同或相似的灵敏度和特异性,而诊断时间大大缩短。 结论：本试验建立的方法具有快速、简捷、操作方便及较高的灵敏度和特异性,适合在畜牧兽医站、出入境检验检疫部门、动物CDC等临床单位的普及与推广应用。