酶是高效的生物催化剂,目前已应用于制药、食品、环保、能源等领域.但是游离态的酶稳定性差,反应后难以回收和重复利用,这些缺点限制了其广泛应用,而酶的固定化可以很好地解决这些难题.通常酶以吸附,交联,包埋和共价结合等方式固定于基底上.最近,有很多新型基底材料用于酶的固定,如氧化石墨烯,碳纳米管,介孔材料,磁性高分子微球,离子液体等.本文首先采用一锅法以3-巯丙基三甲氧基硅烷(MPTMS作为前驱体合成了一种新型二氧化硅微球(spheres-on-sphere silicaparticles (SOS))，SOS由微球上密集包覆着纳米球形成，有较大的比表面积。随后用顺丁烯二酸酐进行表面修饰，合成了羧基修饰的SOS C SOS-COOH)，利用碳二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺将辣根过氧化物酶CHRP)共价固定到SOS-COOH表面，得到SOS-COOH-HRP复合物。以4-氨基安替比林对羟基苯磺酸/过氧化氢(H202)为底物通过比色法考察固定化酶的活性。实验结果表明,SOS-COOH-HRP在碱性条件下的活性，贮存稳定性及在盐酸肌和尿素中的活性都较游离态的HRP有明显提高。通过优化SOS-COOH-HRP复合物的加入量，体系的反应温度，反应时间，pH值及4-AAP和PSA的浓度，在最优的实验条件下，该体系对H202的检测限可达0.7μM。同时，应用该方法，对10％人血清和稀释100倍的尿液进行了H202加标实验，均得到了较好的实验结果。此外，金属离子、糖类、氨基酸等对该体系没有明显的干扰性，证明该方法具有较好的选择性。而且，这种固定化酶重复利用10次之后仍有较高的反应活性，说明SOS-COOH-HRP复合物有较高的稳定性。