福寿螺HSP70基因的克隆及不同温度刺激下雌雄个体的差异表达

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  采用RACE-PCR技术,对福寿螺(Pomacea canaliculata)进行了热激蛋白70基因(HSP70)的全长cDNA序列克隆(2791bp),其中开放阅读框1932bp,编码了643个氨基酸.BLAST分析显示,福寿螺HSP70基因与其他真核生物有着较高的同源性.采用RT-PCR技术检测雌雄福寿螺在不同温度下,以及同一高温下不同时间点的差异表达.结果显示高温情况下,雌雄福寿螺HSP70的表达均显著增加,低温刺激下hsp70表达没有明显变化.此外,在温度梯度试验和瞬时表达试验中,雄性福寿螺都比雌性更快达到HSP70基因的表达高峰,然而雌性福寿螺表现出比雄性福寿螺更久的高表达持续时间,并且在极端高温下表现出更高的HSP70表达量,结果显示HSP70基因在雌性和雄性福寿螺调节高温的生理响应上都起到非常重要的作用,福寿螺性别间的差异表达可能与高温情况下的热耐力不同有关.本实验为对应极端环境压力下福寿螺的生态适应性机制研究提供了有用的分子生物学信息.
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