【摘 要】
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目的 对乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2生产株进行全序列测定和分析,为进一步了解其基因组结构与疫苗的减毒机制的关系及研究疫苗生产的遗传学质控标准奠定基础.方法 根据已发表的SA14-14-2株及SA14株的序列,设计6对相互重叠片段的引物,通过RT-PCR扩增出SA14-14-2疫苗生产株的Cdna片段,分别克隆到p-GEM-T载体,转化至TG1受体菌中,挑取阳性克隆进行鉴定后测定全序列.结果
【机 构】
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中国药品生物制品检定所 成都生物制品研究所
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目的 对乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2生产株进行全序列测定和分析,为进一步了解其基因组结构与疫苗的减毒机制的关系及研究疫苗生产的遗传学质控标准奠定基础.方法 根据已发表的SA14-14-2株及SA14株的序列,设计6对相互重叠片段的引物,通过RT-PCR扩增出SA14-14-2疫苗生产株的Cdna片段,分别克隆到p-GEM-T载体,转化至TG1受体菌中,挑取阳性克隆进行鉴定后测定全序列.结果 SA14-14-2生产株基因组全序列长10976个核苷酸,从96到10394为一个长开放读码框,编码3432个氨基酸.与国外测定的SA14-14-2株的核苷酸序列和氨基酸序列相比,同源性均在99﹪以上,突变位点分散于各个区域,以往推测的7个可能与减毒相关的位点均示发生改变.1296-1506间有4个突变位点,有可能作为疫苗质控的遗传学标记.结论 乙脑减毒活疫苗生产株的基因组全序列基本类似于已发表的序列,若干不同位点产生的原因可能在于病毒株的不同传代.全序列的测定对于研究疫苗株的减毒机理及疫苗的遗传学质控标准具有一定意义.
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本试验采用气相色谱法,研究制定鱼腥草注射液含量测定的方法.对鱼腥草注射液中的甲基正壬酮进行定量测定,每1ml注射液中甲基正壬酮不得低于0.8ug.本法采用硅酮(OV-17)为固定相,涂布浓度9﹪,柱温150℃,检测器为氢火焰离子化检测器,进样品及检测器温度均为180℃.气体流速:氮气40ml/min;氢气40ml/min;空气为450ml/min.进样量为5ul,试验结果表明:本法色谱峰型对称;理
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本文讲述了苦豆子多糖的提取、精制、并利用苯酚-浓硫酸比色法测定苦豆子多糖含量,结果得其含量为9.865﹪;回收率为101.09﹪;证明此法是可行的.
目的:制备硫酸软骨素膜剂,研究其疗效.方法:以聚乙烯醇为成膜材料制备硫酸软骨素膜剂;分光光度法测定膜剂中硫酸软骨素含量,并进行体外溶出实验及重量差异检测;口腔粘膜下注射甲基紫精(PQ)制备动物口腔粘膜溃疡模型,从溃面直径和愈合期两个方面考察该药膜的疗效.结果:膜中硫酸软骨素含量为5.95±0.29mg/片(n=5);药物全部溶出时限为20min,重量差异符合中国药典规定;与空白组比较,硫酸软骨素膜
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