【摘 要】
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目的:运用有限稀释法体外培养单个细胞,证明在肿瘤细胞系中存在肿瘤干细胞样的等级结构;建立致瘤性不同的人胃癌细胞系BGC-823亚克隆,为研究肿瘤异质性提供较好的实验模型。
【机 构】
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福建省肿瘤医院肿瘤分子生物学研究室福州,350014
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目的:运用有限稀释法体外培养单个细胞,证明在肿瘤细胞系中存在肿瘤干细胞样的等级结构;建立致瘤性不同的人胃癌细胞系BGC-823亚克隆,为研究肿瘤异质性提供较好的实验模型。
方法:通过体外培养亚克隆,初步分离并建立了1个亚克隆细胞系,并利用细胞增殖、细胞周期分析,软琼脂克隆形成和NOD/SCID鼠体内异位移植方法对母株和亚克隆的生物学特性进行比较、分析和鉴定。
结果:1)通过有限稀释法筛选亚克隆。筛选了1株亚克隆,其形态学异型性较母株大,很多细胞像神经元细胞,伸出细长的突起。2)亚克隆生长速度明显慢于母株细胞,细胞周期实验显示亚克隆G1期细胞增加,S期和G2期细胞减少,表明细胞增殖速度慢(G1期64.75％,S期24.18％.G2期11.07％),而母株则分别为(G1期51.78％,S期32.20％,G2期16.02％),BGC-823和亚克隆软琼脂克隆形成数分别为:21.0±2.3和3±1.9,两者间软琼脂克隆形成数的差异有统计学意义(p<0.05)。NOD/SCID鼠皮下成瘤实验显示BGC-823在成瘤速度和致瘤率上都比亚克隆强。
结论:肿瘤细胞系中也存在肿瘤干细胞样的等级结构;不同致瘤特性人肿瘤细胞系BGC-823亚克隆细胞系的建立,能为研究肿瘤异质性提供较理想的实验模型。
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