目的 脓毒症的发生与单核/吞噬细胞的Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)识别菌体成分后导致多种炎症细胞因子的大量释放密切相关,因此研究TLRs识别病原分子的结构和功能关系,对寻找新的药物作用靶点、获得新的先导化合物进行脓毒症的防治具有重要意义。本研究拟寻找人TLR9识别CpG ODN的结构域,并研究该结构域结合CpG ODN的重要氨基酸位点。方法 人工合成人TLR9的亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)片段LRR2,5,8,11多肽,生物传感器检测其与CpG ODN的亲和力,激光共聚焦检测LRR多肽对CpG ODN在小鼠腹腔巨噬细胞中内化的影响,ELISA检测LRR多肽对CpG ODN诱导腹腔巨噬细胞NF-κB活化及细胞因子释放的影响,确定与CpG ODN结合的LRR；采用表面电荷分析初步确定该LRR与CpG ODN结合的氨基酸位点,并合成突变多肽进行功能验证,最后用分子对接技术研究人TLR9与CpG ODN相互作用细节。结果 仅LRR11与CpG ODN具有高亲和力；LRR11在体外可显著抑制CpG ODN内化及CpG ODN诱导的小鼠腹腔巨噬细胞NF-κB活化、细胞因子释放；LRR11的5个正电荷位点R337,K338,K347,R348和H353形成2个正电荷区域,5个位点突变均可降低LRR11与CpG ODN的结合,其中R337,K338影响最大；分子对接表明R337和K338通过氢键与CpG ODN结合,而K347,R348和H353虽然不直接与CpG ODN结合,但可影响人TLR9与CpG ODN结合面的形状。结论 LRR11是人TLR9结合CpG ODN的重要结构域,5个正电荷位点尤其是R337,K338是关键结合位点。