【摘 要】
：
[目的]H.parasuis病(格拉泽氏病)的广泛流行,已给养殖业造成严重的经济损失.随着H.parasuis对传统抗生素耐药性的增强,开发新型的治疗药物以及选择可持续性的防治策略已经显得尤为必要.本研究集中探讨大蒜素对H.parasuis的抑菌效果以及抑菌的分子机理,评价大蒜素的毒力抑制作用.为兽医临床防治H.parasuis提供理论基础.[方法]临床无菌采集病料进行H.parasuis的分离鉴
【机 构】
：
福建农林大学,中西兽医结合与动物保健福建省高校重点实验室,福建福州350002
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨
论文部分内容阅读
[目的]H.parasuis病(格拉泽氏病)的广泛流行,已给养殖业造成严重的经济损失.随着H.parasuis对传统抗生素耐药性的增强,开发新型的治疗药物以及选择可持续性的防治策略已经显得尤为必要.本研究集中探讨大蒜素对H.parasuis的抑菌效果以及抑菌的分子机理,评价大蒜素的毒力抑制作用.为兽医临床防治H.parasuis提供理论基础.[方法]临床无菌采集病料进行H.parasuis的分离鉴定和培养；采用试管结晶紫染色法和微孔板结晶紫法对H.parasuis临床分离株的生物被膜形成能力进行定性和定量分析；筛选具有强生物被膜形成能力的强毒力菌株；参照CLSI所介绍的药敏方法检测大蒜素对H.parasuis的最小抑菌浓度(MIC)；通过生长曲线分析梯度浓度的大蒜素对H.parasuis生长的影响；检测大蒜素对H.parasuis的生物被膜形成的影响；通过荧光定量PCR分析大蒜素对H.parasuis部分基因表达水平的影响.[结果]在华南和东南地区共分离得到H.parasuis 32株,通过生物被膜形成能力分析,成功筛选到具有强生物被膜形成能力的V型强毒力菌株HPS-46.通过药物敏感性试验发现大蒜素对H.parasuis最小抑菌浓度(MIC)范围在16-32 μg/mL；其中大蒜素对HPS-46菌株的MIC为32μg/mL.通过大蒜素对H.parasuis生长曲线影响的分析发现大蒜素对体外培养的HPS-46有明显的抑制作用,实验结果表明亚抑菌浓度的大蒜素可将HPS-46到达稳定期的时间推迟1倍的时间.进一步的研究发现8μg/mL和16 μg/mL的大蒜素能够显著抑制HPS-46生物被膜的形成.荧光定量PCR分析发现,经过8μg/mL和16 μg/mL的大蒜素处理的H.parasuis,溶血毒素的主亚基hhdA的表达显著下降；黏附侵袭相关的基因ompP-5、ompP-2、pilA和侵袭性酶prtC的表达水平明显下降；由群体感应系统调控的潜在毒力因子mviN的表达下调；超氧化物歧化酶的基因sodC表达水平上升,而抗生素外排泵相关基因norM表达水平下降.这说明大蒜素对H.parasuis有明显的抑制效果,并且可影响溶血毒素、黏附侵袭、氧化代谢以及抗生素外排泵等相关基因的表达.[结论]本次课题共分离到临床菌株32株,优化了H.parasuis分离培养及鉴定的方法,大蒜素对H.parasuis具有强力抑菌作用,大蒜素对H.parasuis的MIC为16-32μg/mL,亚抑菌浓度即可明显抑制H.parasuis的生长.大蒜素对H.parasuis生物被膜的形成具有显著的抑制作用.大蒜素具备抑制H.parasuis毒力的潜质.大蒜素对毒素基因(hhdA)、黏附侵袭相关基因(ompP-5,ompP-2,prtC)、生长代谢相关基因(sodC, mviN)的表达有抑制作用.大蒜素可以抑制抗生素外排泵norM基因的表达.
其他文献
本文将1日龄AA肉鸡饲喂不含任何药物的饲料饲喂至28日龄后,挑选24只体重相近的健康雄性肉鸡随机分成对照组、盐霉素诱导组、莫能菌素诱导组和马杜霉素诱导组,每组6只.对照组肉鸡连续10天继续饲喂不含任何药物的饲料；盐霉素诱导组、莫能菌素诱导组和马杜霉素诱导组分别连续10天饲喂含有盐霉素(60 mg/kg)、莫能菌素(120mg/kg)和马杜霉素(5 mg/kg)的饲料.采用TRIZOL试剂盒法提取肉
[目的]链霉素(Streptomycin,STR)是一种氨基糖苷类抗生素,其在兽医临床可用于治疗革兰氏阴性敏感菌引起的各种感染.因其潜在的毒性和在食品动物体内残留,我国农业部已规定了链霉素在动物性食品中的最高残留限量(MRLs),其中在牛奶为200 μg/L,肌肉、脂肪和肝脏为600 μg/kg,肾脏为1000 μg/kg.为了建立相关的快速荧光免疫检测方法,本研究合成了2种不同结构的链霉素荧光标
(目的)为了研究伊维菌素可溶性硅酸盐缓控释丸剂的体内外释放及维持时间， (方法)用不同的粘合剂及其比例，制备可溶性硅酸盐的空白大丸，经崩解试验，摸索最佳粘合剂及其比例。按照优势组方试制备伊维菌素缓控释丸剂，通过体外体内释放试验，探索其在体内外伊维菌素释放。(结果)试制备伊维菌素缓控释丸剂在体内外可维持在200天，在体外伊维菌素释放在100～600 ng/mL维持3个月时间，体内在1～6ng/mL维
氟康唑属于三唑类抗真菌药物，对全身及浅表真菌均有抗菌活性，在兽医临床广泛应用于犬、猫等动物的真菌感染。为提高氟康唑作用效果、解决原料药水溶性差的缺陷，很多剂型相继问世。本文结合近年来对氟康唑在兽医临床上不同剂型的研究报道，介绍了各剂型的研究现状，并对未来的发展前景进行了展望。
[目的]盐酸恩诺沙星(Enrofloxacin hydrochloride,EH)易溶于中性或偏碱性溶液,根据生物药剂学分类系统(BCS),该药属于Ⅰ类(高溶解性一高渗透性),由于药物在口腔内快速溶解易于与口腔味觉受体接触,从而表现出明显的苦味.本研究旨在制备掩味EH固体分散体,并考察它的体外溶出效果.[方法]以乙基纤维素(Ec)为载体,PEG-6000为增塑剂、碳酸钙为致孔剂(释放调节剂),采用
[目的]制备酮洛酚(Ketoprofen,KET)肠溶口腔崩解片,达到掩味、减少药物对胃的刺激作用,使药物主要在肠道中溶解、释放和吸收,延长药效.[方法](1)固体分散体的研制：以醋酸羟甲基丙基纤维素琥珀酸酯(HPMCAS)为肠溶性载体,使用双螺杆热熔挤出机制备KET肠溶固体分散体(Solid dispersion, SD),各区段挤出温度均为160℃、螺杆转速：50 rpm/min；获得的挤出物
[目的]土拉霉素广泛用于由敏感菌引起的牛和猪的呼吸系统感染性疾病及牛莫拉氏菌引起的传染性角膜结膜炎的防治,饲料中非法添加会导致土拉霉素残留于动物源性食品中.基于分子印迹技术制备的分子印迹聚合物,具有高度特异性,能从复杂样品中高选择性地吸附模板分子或与其结构相似的化合物,被广泛用于分离,纯化生物样品.本研究以土拉霉素为模板分子,经热引发沉淀聚合制备对土拉霉素等大环内酯类药物具有特异性的分子印迹聚合物
[目的]比较金黄色葡萄球菌接种量和喹诺酮类药物耐药决定区单点突变引起的麻保沙星药效降低的区别,探究清除较大接种量的细菌所需药物浓度是否大于MPC. [方法]构建金黄色葡萄球菌ATCC 29213 grlA等位突变的突变体,采用琼脂二倍稀释法测定麻保沙星对不同接种量5×105,5×106,5×107,5×108 cfu/mL的金葡菌ATCC 29213的最小抑菌浓度(MIC)；用体外静态杀菌曲线测定
在不同时间点，对人工感染柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)的鸡只单剂量口服15ppm的沙咪珠利，并利用透射电镜观察其对柔嫩艾美耳球虫内生阶段超微结构的影响，结果发现：在裂殖生殖阶段，裂殖体分裂异常；裂殖子形态不规则，外膜受损，胞质中出现空泡；微线数目减少，棒状体消失，线粒体肿胀，嵴结构模糊，染色质异染色质化.在配子生殖阶段，小配子体外膜和核膜损伤，胞质呈现空泡化；内质网池、高尔基体肿胀；核内染色
黏菌素(colistin)是一种多肽抗生素,在临床上常作为治疗多重耐药的革兰氏阴性菌引起的感染,尤其可对抗多重耐药菌引起的感染.然而,由于黏菌素的肾毒性和神经毒性而使其临床应用受到限制.由于神经生长因子(NGF)对中枢和周围神经均具有保护作用,而中药黄芩苷(baicalin)具有抗氧化等作用,但尚未见其对黏菌素所引起周围神经毒性保护作用的研究.本试验以NGF作为神经保护作用的阳性对照组,来研究中药