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目的:采用单柱二维液相色谱对苦瓜中的主要活性蛋白苦瓜素进行分离纯化。
方法:从苦瓜种仁中提取苦瓜素,然后采用具有离子交换和疏水双功能的分离介质将苦瓜素粗提液首先在离子交换模式下进行第一维分离,再将收集到的4个色谱馏分分别在疏水模式下进行第二维色谱分离。
结果:SDS-PAGE结果表明第一维离子交换色谱得到的色谱馏分1经HIC可分离得到目标蛋白苦瓜素,纯度大于95%,色谱馏分2含有少量目标蛋白,但主要为杂蛋白,馏分3和4中不含有目标蛋白。
结论:仅靠单一的阳离子交换色谱或疏水色谱无法实现对苦瓜素的分离纯化,而把阳离子交换色谱和疏水色谱这二者结合起来,采用具有离子交换和疏水双功能分离介质和单柱二维液相色谱技术,用一根色谱柱就可以对苦瓜素进行分离纯化,方法简单,可大大简化生产工艺,降低生产成本。