海参Ⅰ型胶原蛋白α链的基因克隆及纯化鉴定

来源 :2016年中国水产学会水产品加工与综合利用分会学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guanshui6
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  胶原蛋白是海参体壁含量最多的蛋白质,其在海参的生理活动中起着重要的作用.本研究从海参体壁中克隆获得了Ⅰ型胶原蛋白α链的cDNA (COLα).COLα的cDNA全长4623 bp,开发阅读框4203 bp,共编码1400个氨基酸,预测其分子量为131.7 kDa,理论等电点为6.17;功能结构域分析表明,其含有胶原蛋白家族典型的N端前肽区、三股螺旋区、C端前肽;多序列比较分析表明,其与海胆胶原氨基酸序列相似度为55.93%.荧光定量PCR结果显示COLα在海参各个组织中均有分布,且在肌肉层的表达量最高.同时,本研究从海参体壁肌肉层中提取了高纯度的酶促溶性胶原蛋白(PSC),其由α链、β链及分子量更高的γ链组成.运用肽质量指纹图谱分析PSC中α链,结果获得了967个氨基酸残基,其与克隆获得的COLα氨基酸序列相似性为100%,表明制备的PSC α链即为COLα.综上,本研究可为海参胶原蛋白的鉴别提供更有价值的信息,亦可更加深入研究海参胶原蛋白的生物学特性.
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