新生大鼠海马神经元的体外培养

来源 :第七届内蒙古自治区自然科学学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aramis_Rose
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掌握新生大鼠神经元体外培养方法,观察海马神经元形态学特点,测定细胞生长曲线.方法;新生SD乳鼠,剥离海马,胰酶消化接种,1d换为Neurobasal培养基;小鼠抗大鼠微管相关蛋白-2、兔抗鼠神经元特异性烯醇化酶为一抗,免疫细胞化学法计数阳性细胞百分率并显微摄影;1%甲苯胺蓝、苏木精伊红染色.结果:原代培养神经元6~8h内开始贴壁,培养5~7d突起增粗增长,连接成网,以多极神经元为主,胞体呈三角形、梭形、椭圆形;MAP-2、NSE染色为棕褐色,经鉴定神经元纯度达90%左右;细胞经历生长潜伏期,对数生长期,平台期;细胞核大而圆,H-E染色胞核深蓝色,胞浆红色,胞体中可见尼氏颗粒.相差显微镜下神经元形态多样,MAP-2、NSE染色阳性细胞;H-E染色细胞核呈深蓝色,胞浆为红色;尼氏体位于细胞质内,神经突起内少见.
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