【摘 要】
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目的：探讨脊髓损后,抑制TNFR/RIPK信号通路对于脊髓损伤(Spinal Cord Injury,SCI)的保护作用,为临床治疗SCI提供新的思路和方向.方法：120只雄性,SPF级SD大鼠,体重0.25-0.30 kg.随机将动物分为4组：假手术组(Sham组)、假手术+Necrostatin-1(Nec-1)组(sham+Nec-1组)、SCI+二甲基亚砜(DMSO)(DMSO组)、SCI
【出 处】
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中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会
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目的：探讨脊髓损后,抑制TNFR/RIPK信号通路对于脊髓损伤(Spinal Cord Injury,SCI)的保护作用,为临床治疗SCI提供新的思路和方向.方法：120只雄性,SPF级SD大鼠,体重0.25-0.30 kg.随机将动物分为4组：假手术组(Sham组)、假手术+Necrostatin-1(Nec-1)组(sham+Nec-1组)、SCI+二甲基亚砜(DMSO)(DMSO组)、SCI+Nec-1组(Nec-1组).各组又分为伤后6h、12h、24h、3d和7d五个亚组(每个大组30只每个亚组6只).采用钳夹法制作大鼠急性脊髓损伤模型,硬膜下放置管局部给药,Sham组不作任何处理,sham+Nec-1组和Nec-1损伤后30分钟经导管注射1ul Nec-1(25μg/μl),DMSO组组相同时间点注射等量DMSO.按照亚组时间点取组织,取组织前进行Basso/Beattie/Bresnahan(BBB)评分.采用苏木素-伊红(HE)染色、尼氏(Nissl)染色观察神经组织病理变化,SCI后24h取材行碘化丙啶(propidine iodide,PI)染色、Tunel法检测细胞凋亡情况,Western Blot(WB)检测Bcl-2,RIPK1及RIPK3蛋白的表达水平.结果：术后BBB评分Sham组和sham+Nec-1组均正常,除6h外Nec-1组 BBB 评分明显高于DMSO组(P＜0.05).损伤后7天内,Sham组和sham+Nec-1组的HE 和 Nissl 染色正常,各时间点Nec-1组脊髓组织损伤程度和存活神经元数量均优于DMSO组,差异有统计学意义(P＜0.05).PI染色Nec-1组较DMSO组组红染细胞明显减少,神经元崩解减轻(P＜0.05).SCI后24h时,Nec-1组较DMSO组凋亡小体数量明显减(P＜0.05).Bcl-2蛋白在Sham组和sham+Nec-1组中表达稳定,在Nec-1组表达上调较DMSO组差异有统计学意义(P＜0.05).坏死性凋亡蛋白RIPK1和RIPK3在Sham组和sham+Nec-1组低水平表达,在DMSO组表达升高,Nec-1组表达下调(P＜0.05).结论：抑制TNFR/RIPK信号通路有助于急性脊髓损伤后神经功能的恢复.
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