【摘 要】
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背景:诱导软骨细胞凋亡的持续静态压力的幅度和持续时间尚不明确,且持续静态压力诱导的软骨细胞凋亡的信号转导机制目前仍不清楚.
目的:建立一个持续静态压力诱导的颈椎椎
【出 处】
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江西省骨科高峰论坛暨骨科学分会第十六次年会
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背景:诱导软骨细胞凋亡的持续静态压力的幅度和持续时间尚不明确,且持续静态压力诱导的软骨细胞凋亡的信号转导机制目前仍不清楚.
目的:建立一个持续静态压力诱导的颈椎椎体生长板软骨细胞凋亡的模型,并探讨bcl-2、bax、caspase-3和cytochrome c在其中的作用.
方法:取4周龄SD大鼠的颈椎椎体生长板软骨进行体外分离、培养软骨细胞.原代细胞传代后采用Ⅱ型胶原免疫荧光法对软骨细胞进行鉴定,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法绘制细胞生长曲线.将软骨细胞放置在压力装置中,采用不同静态压力(0、0.1、0.2、0.4MPa)和不同持续时间(1、6、12、24h)作用后,CCK-8法检测细胞存活率,TUNEL染色法检测细胞凋亡率,Western blot检测bcl-2、bax、caspase-3和cytochrome c的表达.
结果与结论:在持续静态压力大于或等于0.2MPa、作用时间大于或等于12h的条件下,软骨细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05),且随着静态压力的增大或者加压时间的延长,与对照组相比,各实验组细胞凋亡率呈压力或时间依赖性增高(P<0.05),抗凋亡蛋白bcl-2表达降低,促凋亡蛋白bax、caspase-3表达增高,cytochrome c活性亦增加.
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