雷公藤甲素对H9c2心肌细胞肥大反应及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1a表达的影响

来源 :中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会第十一届全国学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ytfeng
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目的:观察雷公藤甲素(triptolide,TP)对血管紧张素(angiotensin,Ang)Ⅱ及异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的大鼠心肌细胞株H9c2肥大反应以及对细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1a(cyclin-dependent kinase inhibitor 1a,CDKN1a)mRNA表达的影响. 方法:心肌细胞株H9c2传代培养,MTT法检测其对TP的耐受浓度.随后接种细胞至12孔板,分为6组:对照组,模型组和TP(0.3、1、3、10μg/L)组,分别给予PBS、AngⅡ(10-6mol/L)或者ISO(10-5 mol/L)、AngⅡ(10-6mol/L)或者ISO(10-5mol/L)加TP(0.3、l、3、10μg/L).继续培养24h后,鬼笔环肽染色测定细胞面积,BCA法测定细胞蛋白质含量,Real-time PCR检测β肌球蛋白重链(myosin heavy chain β,β-MHC)mRNA、心房利钠肽(Atrial natriuretic peptide,ANP)mRNA和CDKN1a mRNA表达水平. 结果:1~30μg/L TP培养48h能明显抑制H9c2细胞生长,而0.1~10μg/L培养24小时则对其无明显影响。经AngII刺激,H9c2细胞面积、蛋白质含量、β-MHC mRNA、ANP mRNA及CDKN1a mRNA表达量均显著增加,给予TP 1~10μg/L干预后心肌细胞面积、蛋白质含量、β-MHC mRNA、ANP mRNA及CDKN1a mRNA表达量均明显降低。经ISO刺激,H9c2细胞蛋白质含量、β-MHC mRNA、ANP mRNA及CDKNIa mRNA表达量均显著增加,给予TP 3、10μg/L干预后蛋白质含量、β-MHC mRNA、ANP rnRNA及CDKN1a mRNA表达量均明显降低。 结论:本实验采用0.3~10μg/L的剂量培养24h,未影响细胞的生长。在分别用作用于血管紧张素受体亚型1的AngII和作用于β肾上腺素受体的ISO刺激H9c2心肌细胞株肥大后,使用小剂量的雷公藤甲素能显著降级大鼠心肌细胞H9c2 CDKN1a mRNA表达,抑制其肥大反应。
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