ALV-J gp85基因重组蛋白与免疫佐剂联合接种雏鸡诱导免疫保护作用研究

来源 :2012第四届中国兽药大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huming_72
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  目的:探讨使用ALV—J囊膜蛋白基因gp85原核表达产物联合不同免疫佐剂及使用不同免疫次数诱导雏鸡产生保护性抗体的变化和抗ALV—J感染的作用。方法:设计引物,经PCR扩增出.ALV—J囊膜蛋白gp85基因,转染至原核表达系统,经诱导后得到目的基因的重组蛋白,纯化后作为免疫蛋白;并用弗氏佐剂和CpG佐剂联合接种7日龄雏鸡,接种后第3周部分鸡只进行二次免疫接种,第8周进行攻毒试验,攻毒后观察3周。试验期间每周取血清检测ALV—J抗体,攻毒后检测ALV—J病毒血症和致病性,使用IFA检测脾脏组织的ALV—J分布。结果:经原核表达的蛋白能够特异性结合ALV—J的单克隆抗体,使用该表达蛋白能够诱导少部分鸡只产生抗体(小于50j1),抗体效价低(最高ELISA效价S/P值为1.25)、阳性抗体维持时间极短(小于7天);二次免疫后可使大部分鸡只产生(大于80%),抗体效价升高(最高S/P值为2.09),维持时间延长(约14天);使用弗氏佐剂和CpG佐剂联合表达蛋白可使全部鸡只产生抗体,效价s/P值可达3.30,维持时间进一步延长(约56天),二次免疫可增强这种免疫效果,产生高效价抗体维持在70天以上。蛋白免疫组可减少病毒血症产生免疫保护率为33.3%,弗氏佐剂与蛋白联合免疫组免疫保护率为53.8jl,弗氏佐剂和CpG佐剂与蛋白联合免疫免疫保护率为66.7S;另外,弗氏佐剂和CpG佐剂与蛋白联合免疫明显降低ALV—J的致病性。结论:以上结果表明使用弗氏佐剂和CpG佐剂可增强ALV—J囊膜蛋白基因原核表达蛋白的免疫原性,产生较好免疫保护作用,二次免疫可增强首次免疫后抗体反应和免疫保护作用。本研究为开发有效地ALV—J亚单位疫苗提供科学依据。
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