【摘 要】
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目的：通过胚鼠皮质神经元的体外培养，探讨遭受缺氧刺激时，脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophicfactor，BDNF)对神经元发挥保护作用时所启动的细胞内信号传导通路。方法：对胚鼠皮质神经元进行体外培养，提取不同缺氧时间点单纯缺氧的对照组及BDNF干预组(又分为单纯BDNF干预组和BDNF加相应阻滞剂干预组)的细胞蛋白，采用免疫印记(western blottin
【机 构】
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四川大学华西第二医院儿科 四川大学华西医院移植免疫实验室 610041
【出 处】
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中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会
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目的：通过胚鼠皮质神经元的体外培养，探讨遭受缺氧刺激时，脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophicfactor，BDNF)对神经元发挥保护作用时所启动的细胞内信号传导通路。
方法：对胚鼠皮质神经元进行体外培养，提取不同缺氧时间点单纯缺氧的对照组及BDNF干预组(又分为单纯BDNF干预组和BDNF加相应阻滞剂干预组)的细胞蛋白，采用免疫印记(western blotting)方法检测两组神经元在细胞外信号调节激酶(extracellular signal—related kinase，ERKl/2)，磷酸化ERK1/2、蛋白激酶Akt/磷酸化Akt、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 Mitogen-activated protein ldllasc，P38MAPK)/磷酸化P38MAPK及cAMP反应元件结合蛋白(cAMP responsiveelement-binding protein，CREB)，磷酸化CREB表达上的差别.
结果：与单纯缺氧组比较加入BDNF可引起磷酸化ERK1/2，磷酸化AKT及磷酸化CREB表达的增强，而磷酸化的P38MAPK则检测不到。且加入ERK1/2通路特异性的阻滞剂U0126后，磷酸化ERK1/2和磷酸化CREB的表达明显减弱；而加入激磷脂酰肌醇3激酶(PI-3-Kinase)的阻滞剂LY294002后，磷酸化AKT及磷酸化CREB表达亦出现减弱。
结论：BDNF引起磷酸化ERK1/2，磷酸化AKT及磷酸化CREB表达的上调可能为BDNF发挥对缺氧神经元保护作用的机理之一。
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