单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,简称单增李斯特菌)是四大食源性病原之一,在环境中广泛存在,且对环境的耐受能力较强.人和动物食用了单增李斯特菌污染的食物后,细菌进入消化道并跨越宿主肠道屏障,随血液循环分布至全身脏器中,或穿过血脑屏障和胎盘屏障造成脑炎和流产等.国外学者对于该菌的致病机制研究比较深入,但在致脑炎机制方面研究还有待深入.斑马鱼具有个体小、数量多及遗传操作简便等优点，作为一种新的实验动物模型被广泛用于生物医学领域。本研究旨在建立无菌斑马鱼胚胎培育体系和李斯特菌多种途径感染模型，结合转录组学技术探索免疫相关基因及其功能。脑室或静脉注射能致渐进性死亡;浸泡感染不引起鱼死亡，但多个包括mmp-9在内的免疫相关基因转录水平显著提高。转录组学分析显示浸泡感染无菌鱼的大部分上调基因与先天免疫相关，其中基质金属蛋白酶Mmp-9上调最显著。用特异的Morpholino抑制Mmp-9表达的斑马鱼对细菌更易感:Mmp-9抑制的鱼在静脉注射感染后体内细菌量比正常鱼更多，更早出现死亡;mmp-9基因沉默显著抑制脑室注射鱼巨噬细胞向脑内的迁移，mmp-9和cd44基因沉默的小鼠巨噬细胞通过惰性聚碳酸脂膜的能力显著下降。综上，无菌斑马鱼胚胎培养体系可以研究病原感染的免疫应答模型，发现了Mmp-9的募集巨噬细胞的跨膜作用不依赖蛋白酶活性。