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目的本研究主要探讨IL-6/ΔNp63α/Notch轴在慢性香烟暴露诱导肺癌干细胞的调控作用及机制,并在此基础上研究莱菔硫烷对慢性香烟暴露诱导肺癌干细胞的干预作用。方法采用ELISA和Western blotting方法检测肺癌病人组织中ΔNp63α、肺癌干细胞标记分子及IL-6的表达。人正常支气管上皮细胞(HBE)慢性暴露于2%香烟烟雾提取物(CSE)55代后,检测其集落形成能力、恶性转化相关蛋白和肺癌干细胞标记分子表达、肿瘤发生率。转染ΔNp63α质粒和siRNA-ΔNp63α后,通过体外克隆形成实验、免疫荧光、双荧光素酶报告基因实验和Western blotting方法观察ΔNp63α对慢性吸烟暴露诱导肺癌干细胞特性和Notch通路活性的影响。同时,观察IL-6对慢性吸烟暴露诱导肺癌干细胞活性及ΔNp63α表达的影响。此外,体内和体外实验分析莱菔硫烷对慢性吸烟暴露诱导肺癌干细胞活性、IL-6、ΔNp63α和Notch通路的影响及其作用。结果肺癌组织中,吸烟组ΔNp63α的表达水平显著高于非吸烟组,且ΔNp63α的表达与肺癌干细胞标记分子的表达成正相关。连续香烟烟雾暴露55代的HBE细胞(THBE)克隆形成能力、恶性转化相关蛋白和肺癌干细胞标记分子的表达以及裸鼠成瘤率均显著高于连续传代但无香烟暴露的细胞(CHBE),提示THBE细胞获得肺癌干细胞样特性。THBE细胞中ΔNp63α高表达;过表达ΔNp63α促进THBE体外克隆成球能力,上调肺癌干细胞标记分子的表达;抑制ΔNp63α的表达与之相反。THBE悬浮细胞球中Notch通路关键调控因子NICD和Hes1显著高表达。抑制Notch信号通路活性降低THBE悬浮细胞球的体积和数目,下调肺癌干细胞标志分子的表达;ΔNp63α能转录激活Notch通路活性。肺癌组织中,吸烟组IL-6的水平显著高于非吸烟组,且IL-6的表达与ΔNp63α的表达成正相关;IL-6能促进THBE悬浮细胞球中ΔNp63α和肺癌干细胞标志分子的表达。体内外实验同时显示,莱菔硫烷能抑制THBE体外克隆成球能力,下调THBE悬浮细胞球中肺癌干细胞标志分子、TL-6表达,和抑制Notch信号通路活性。结论本研究首次揭示莱菔硫烷经IL-6/ΔNp63α/Notch轴干预慢性吸烟暴露诱导肺癌干细胞的干预作用。