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目的:人工关节置换术已成为治疗各种关节疾病终末期病变最普遍而有效的方法,在磨损颗粒诱导的无菌性松动中,TNF-α被视为引起骨吸收最重要的炎性细胞因子,构建人TNF-α基因的siRNA真核表达载体,探讨其对人单核细胞中TNF-ɑ基因表达的干涉作用.方法:根据GenBank中TNF-α基因的序列及siRNA设计原则,在编码区内选择两段21nt(分别位于基因序列中:310-330;718-738)作为不同的干涉区域,分别进行BLAST分析.根据RNA 干涉载体PSilencer4.1-CMV neo的要求分别于上、下游引入BamHⅠ和HindⅢ酶切位点.