【摘 要】
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目的:前期我们借助q PCR芯片筛选发现牙髓干细胞内长链非编RNA LincROR可能是细胞"干性"维持关键分子,本研究旨在明确Linc-ROR在牙髓干细胞自我更新能力维持中的作用。方法:
【机 构】
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军事口腔医学国家重点实验室第四军医大学口腔医学牙体牙髓病科; 陕西省口腔医学重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81070803,81170930,81570938)
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目的:前期我们借助q PCR芯片筛选发现牙髓干细胞内长链非编RNA LincROR可能是细胞"干性"维持关键分子,本研究旨在明确Linc-ROR在牙髓干细胞自我更新能力维持中的作用。方法:构建Linc-ROR shRNA慢病毒载体,转染牙髓干细胞,利用CCK8增殖和CFU-F克隆形成实验,流式细胞仪细胞表面标记分子检测,以及茜素红、油红O染色和q PCR比较转染前后牙髓干细胞干性表型改变,并借助q PCR检测干性分子(Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc和Nanog)表达改变。结果:抑制Linc-ROR表达细胞增殖率明显降低,细胞克隆结节形成数目减少;流式细胞仪检测发现与间充质干细胞干性密切相关的CD105、CD146表达随着Linc-ROR表达抑制而显著降低;体外诱导牙髓干细胞成牙本质/成骨细胞向分化14天,抑制Linc-ROR表达矿化结节数减少,成牙本质细胞分化标记蛋白DSPP,RUNX2 mRNA表达水平降低;而体外诱导h DPSCs成脂向分化30天,抑制Linc-ROR脂滴形成数减少,PPAR-γ表达降低。此外,q PCR检测发现Linc-ROR Knockdown后细胞干性分子Oct4表达降低。结论:长链非编码RNA Linc-ROR在牙髓干细胞的干性维持中发挥重要作用,Linc-ROR可能通过调控Oct4表达参与细胞干性维持。
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