【摘 要】
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目的：不同浓度氟化钠(NaF)对H9c2心肌细胞进行染毒培养，细胞色素C释放和caspase家族的表达在氟化物诱导心肌细胞凋亡中的意义方法：H9c2心肌细胞经不同浓度NaF作用48h和72h后，采用MTT法对细胞增殖进行研究；运用HE染色法观察心肌细胞的形态变化；采用流式细胞术观测氟对细胞线粒体膜电位(△Ψm)和细胞早期凋亡率的影响；实时荧光定量PCR法检测凋亡途径(线粒体途径)中的重要基因(ca
【机 构】
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山西医科大学公共卫生学院 山西医科大学实验动物中心 山西,太原,迎泽区新建南路56号,030001
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目的：不同浓度氟化钠(NaF)对H9c2心肌细胞进行染毒培养，细胞色素C释放和caspase家族的表达在氟化物诱导心肌细胞凋亡中的意义方法：H9c2心肌细胞经不同浓度NaF作用48h和72h后，采用MTT法对细胞增殖进行研究；运用HE染色法观察心肌细胞的形态变化；采用流式细胞术观测氟对细胞线粒体膜电位(△Ψm)和细胞早期凋亡率的影响；实时荧光定量PCR法检测凋亡途径(线粒体途径)中的重要基因(caspase-3、caspase-9和Cyt c)以及AMPKα的mRNA表达量；。结果：实验结果显示，低剂量的氟对细胞的增殖没有明显影响，随NaF浓度的逐渐增大，氟对细胞增殖的抑制作用逐渐增强，细胞形态呈现较明显的变化，细胞间的相互连接逐渐消失，细胞膜变得模糊不清。在20 mg/L NaF作用下，细胞核开始发生碎裂，胞核中染色质聚集。在40mg/L NaF作用下，细胞间连接几乎完全丧失，细胞外观形态扭曲，轮廓模糊；经NaF作用后，心肌细胞JC-1探针绿色荧光呈上升趋势，说明氟会导致心肌细胞△Ψm下降；细胞早期凋亡率随NaF浓度的增大也呈上升趋势，与△Ψm的变化共同说明氟会导致H9c2心肌细胞发生凋亡；随NaF剂量的增大，各实验组caspase-3、caspase-9和Cyt c mRNA表达量与正常对照组比较均呈现上升趋势。结论：细胞色素c的释放参与了氟诱导H9c2心肌细胞毒性的损伤过程；氟诱导H9c2心肌细胞凋亡的作用机制与激活线粒体通路有关。
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