【摘 要】
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目前,与脑保护及脑修复研究相关的体外细胞培养主要为两大类:一类是某一细胞单独培养,如神经元,星形胶质细胞或大脑毛细血管内皮细胞单独培养;另一类为多细胞共培养,如神经元
【机 构】
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大连医科大学脑疾病研究所辽宁省脑疾病重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金课题(No.30470682,No.30950025);高等学校博士点科研基金课题(No.200801610003);辽宁省高等学校优秀人才支持计划课题(No.2008RCl2);辽宁省“百千万人才工程”培养经费资助项目(No.2008921067)资助
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目前,与脑保护及脑修复研究相关的体外细胞培养主要为两大类:一类是某一细胞单独培养,如神经元,星形胶质细胞或大脑毛细血管内皮细胞单独培养;另一类为多细胞共培养,如神经元与星形胶质细胞混合共培养以及利用Transwell系统将星形胶质细胞等与大脑毛细血管内皮细胞共培养借以研究血脑屏障。在第一类的培养方法中,影响因子直接加入细胞培养基中,进而作出相关评估。这种方法忽略了体内环境中神经元周围两种重要细胞:大脑毛细血管内皮细胞和星形胶质细胞。这两种细胞与神经元关系非常密切,相互作用,相互影响,在脑保护与脑修复研究中应给予高度重视。不同的影响因子,其作用的靶细胞也不尽相同,有的可通过作用于神经元发挥作用,有的作用于毛细血管内皮细胞或星形胶质细胞,有的在生理条件下则可能无法通过血脑屏障。单独体外培养的神经元显然无法满足关于脑保护与脑修复研究的全部需要。而第二类培养方法中,只侧重了研究了星胶质细胞与大脑毛细血管内皮细胞或神经元的相互作用,忽略了大脑毛细血管内皮细胞、星形胶质细胞及神经元三者相互作用的系统关系。基于以上原因,我们利用原代培养的SD大鼠大脑毛细血管内皮细胞、星形胶质细胞及神经元建立了Transwell三细胞系统模型。该模型的建立,不仅可以实现模拟三种细胞在类似于血脑屏障结构及其客观微环境下的存活、生长、分化、功能、损伤、修复及相互作用,同时借助Transwell的结构特点,我们还可以分别对神经元、星形胶质细胞及血脑屏障结构预处理后再共培养,可以根据影响因子的实际来源将其加到模型中的不同位置,大大提高了实验的准确性与可靠性,为脑保护与脑修复研究提供了一个更加科学可信的新平台。
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