【摘 要】
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目的：构建具有神经组织表达特异性的人Noggin基因的真核表达载体,以进一步为研究Noggin基因在神经系统发育成熟、功能机制方面的研究。方法：根据人Noggin基因的序列,设计合成一对5端分别含有HindⅢ和XbaI酶切位点的特异性引物,运用RT-PCR方法克隆人Noggin基因的cDNA序列；回收PCR产物,并将其连接到pMD18simple T载体中；重组的pMD18 simple T在大肠
【出 处】
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第六次全国中西医结合神经科学术会议
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目的：构建具有神经组织表达特异性的人Noggin基因的真核表达载体,以进一步为研究Noggin基因在神经系统发育成熟、功能机制方面的研究。
方法：根据人Noggin基因的序列,设计合成一对5端分别含有HindⅢ和XbaI酶切位点的特异性引物,运用RT-PCR方法克隆人Noggin基因的cDNA序列；回收PCR产物,并将其连接到pMD18simple T载体中；重组的pMD18 simple T在大肠杆菌DH5α内扩增后,经质粒提取、HindⅢ和XbaI酶切,筛选出阳性重组子,并进行基因测序鉴定；琼脂糖凝胶电泳回收含有人Noggin基因的cDNA序列,以及带有神经组织特异性启动子(alpha1-微管蛋白启动子)的真核表达载体pCS2[Ta1]-GFP的酶切产物，然后在T4 DNA连接酶作用下将二者连接，重组质粒经HindⅢ和XbaI酶切鉴定，并再次测序。
结论：成功构建了人Noggin基因的神经组织特异性真核表达载体pCS2[Ta1]-Noggin。
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