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构建HcV Ns5B全长基因及几种截短形式的重组原核表达质粒，并获得HCVNS5B—fulllengtl(HCVNS5B-FL)，HCVNS5B-C21，HCVNS5B-C51蛋白即分别为全长Ns5B，C端截短21个氨基酸Ns5B、C端截短51个氨基酸Ns5B蛋白的高效表达，为以其为靶位的抗HcV药物筛选奠定基础。利用PCR技术扩增三种长度的NS5B基因，BamH I和Xho双酶酶切后连接到经同样酶酶切的原核表达载体pET-28a(+)上，转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株，IPTG诱导表达，SDS-PAGE电泳进行鉴定。成功构建了三种重组质粒pET-28a(+)-NS5B-FL，pET-28a(+)-NS5B-C21，pET-28a(+)-NS5B-C51，分别表达6His-NS5B*FL，6His-NS5B-C21，6His-Ns5B-C51三种融合蛋白，表达的6His-NS5B-FL主要以包涵体形式存在，而表达的6His-NS5B-C21、6His-NS5B-C51的可溶性明显增加。表达的三种融合蛋白经Ni-Sepharase 6 Fast Flow凝胶纯化，获得了表达的目的蛋白，为进一步的抗HCV药物筛选奠定基础。