人卵巢癌基因治疗的体外实验研究

来源 :中华医学会第十次全国妇产科学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a419132258
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  目的 构建含CDglyES融合基因的重组腺病毒,并观察其在体外对人卵巢癌细胞的直接抑瘤作用和对血管内皮细胞的抑制作用.方法用PCR方法扩增CD基因和glyES基因片段,构建成腺病毒穿梭质粒pAdCDglyES.用细菌内同源重组方法与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1重组构建出重组腺病毒质粒prAdCDglyES.经脂质体介导转染293包装细胞,进而扩增获取重组腺病毒rAdCDglyES.用MTT法检测rAdCDglyES对人卵巢癌细胞株SKOV-3细胞的生长抑制率及其表达产物对脐静脉血管内皮细胞ECV304增殖的影响.结果:纯化的rAdCDglyES滴度为1x1013.3TCID50/L,对SKOV-3细胞的生长抑制率达(83.1±6.3)%,与对照rAd-LacZ (24.1 ±13.2)%比较有显著性差异,P<0.01.浓缩的转染了rAdCDglyES的细胞培养上清液对ECV-304细胞增殖的抑制率为(78.7±1.6)%,而同样浓缩的转染了rAd-CD的细胞培养上清液抑制率仅为(23.9±9.7)%,二者有显著性差异,P<0.01.结论:本研究表明rAdCDglyES在体外对人卵巢癌具有直接和间接抑瘤作用.
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