【摘 要】
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目的:探讨17β-雌激素治疗对脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响,以及对体外培养神经细胞的兴奋毒性作用与JNK蛋白磷酸化作用的关系. 方法:将脊髓损伤大鼠随机分为2组:对照组,
【出 处】
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中华医学会第十四届骨科学术会议暨第七届COA国际学术大会
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目的:探讨17β-雌激素治疗对脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响,以及对体外培养神经细胞的兴奋毒性作用与JNK蛋白磷酸化作用的关系.
方法:将脊髓损伤大鼠随机分为2组:对照组,雌激素治疗组,并设置假手术组(只做椎板切除).雌激素组术后30分钟给予0.4 mg/kg 17β-雌激素(溶于DMSO)尾静脉注射治疗,对照组和假手术组在相同时间点通过尾静脉分别给予同等剂量的DMSO.分别于治疗后2小时、4小时、6小时、12小时、24小时取包含损伤节段脊髓组织,每组5只,包埋后冰冻切片,运用TUNEL法观察损伤节段脊髓组织细胞凋亡的变化;采用免疫组化法检测损伤节段脊髓组织磷酸化JNK(pJNK)蛋白表达的变化.体外培养神经细胞,将第三代细胞分为对照组,10nM 雌激素组,500μM 谷氨酸盐组,10nM 雌激素+500μM谷氨酸盐组;运用JNK蛋白特异性阻滞剂SP600125阻断JNK蛋白的作用,观察雌激素的神经保护作用与JNK蛋白的关系.采用MTT法观察各组神经细胞活性;运用DAPI染色观察各组细胞凋亡的形态变化;Western-blot法检测各组pJNK蛋白表达变化.
结果:雌激素治疗能抑制脊髓损伤后损伤节段脊髓组织神经细胞的凋亡和JNK蛋白的磷酸化.相关性分析结果提示脊髓损伤后24小时,细胞凋亡的数量与JNK蛋白磷酸化呈相关关系;体外实验结果发现,雌激素能维持神经细胞活性,抑制谷氨酸盐引起的神经细胞凋亡和JNK蛋白的磷酸化;在JNK蛋白特异性阻滞剂SP600125的作用下,雌激素的神经保护作用明显减弱.
结论:17β-雌激素可能通过抑制JNK蛋白磷酸化发挥神经保护作用.
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