【摘 要】
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目的:观察ube2c基因在斑马鱼胚胎发育不同时间点的表达规律,以便今后对其功能作用进行进一步的研究.
方法:选择受精后0小时(hour post fertilization,hpf)、2hpf、4hpf、
【机 构】
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河北医科大学实验动物学部050017
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目的:观察ube2c基因在斑马鱼胚胎发育不同时间点的表达规律,以便今后对其功能作用进行进一步的研究.
方法:选择受精后0小时(hour post fertilization,hpf)、2hpf、4hpf、8hpf、12 hpf、24hpf、48hpf、72hpf及7dpf(day post fertilization,dpf)的斑马鱼鱼卵,提取RNA、反转录后进行Real-Time PCR对ube2c在不同时间段的表达进行检测;通过合成的地高辛标记反义ube2c RNA探针,对以上各时间段胚胎进行整胚原位杂交,观察ube2c在斑马鱼胚胎发育过程中的时空表达规律.
结果:Real-TimePCR结果显示,发现ube2c在0hpf(1-cell)即有表达,4hpf(囊胚期)其表达最高,在孵化期(48hpf)之后则降低到较低水平.整胚原位杂交显示,0hpf即可检测到ube2c的表达信号,并集中在胚盘处;从卵裂期(0.75-2.25hpf)直到12hpf,ube2c均呈广泛性分布;24 hpf开始,表达信号呈现一定组织特异性,在48hpf之后,信号主要集中耳囊、肝、生殖系等处.
结论:斑马鱼ube2c的表达具有明显的母源表达特征,推测其可能通过参与母源蛋白的泛素化降解来调控胚胎的发育,其在耳囊、肝、生殖系等组织器官的特异性表达也为UBE2C在胚胎发育中的功能研究提供了研究方向，对胚胎发育过程的研究对了解相关肿瘤的发生发展机制具有重要指导作用。
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