【摘 要】
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H7N9 A型流感病毒(Influenza A virus,IAV)是对公共卫生安全危害严重的新发人兽共患病病原.2013年中国首次报道人和禽感染H7N9亚型IAV,此后该病在不同地区时有发生.自2016年冬季开始,我国H7N9呈现病例增多、散发程度高等特点.仅2017年3月,我国卫计委官方通报96例人感染H7N9 IAV,其中47人死亡,死亡率超过48％.IAV可通过其病毒蛋白抑制干扰素(IFN
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,兰州730046 中国农业科学院哈
【出 处】
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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议
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H7N9 A型流感病毒(Influenza A virus,IAV)是对公共卫生安全危害严重的新发人兽共患病病原.2013年中国首次报道人和禽感染H7N9亚型IAV,此后该病在不同地区时有发生.自2016年冬季开始,我国H7N9呈现病例增多、散发程度高等特点.仅2017年3月,我国卫计委官方通报96例人感染H7N9 IAV,其中47人死亡,死亡率超过48％.IAV可通过其病毒蛋白抑制干扰素(IFN)产生来逃避宿主免疫系统识别,从而形成持续感染,增强其致病力,已报道的IFN抑制蛋白有NS1,PB1-F2,PB2等.但仍有其它IFN抑制蛋白及其抑制机制尚不清楚.本研究拟以A/Environment/Suzhou/SZ19/2014 ( H7N9)流感毒株为研究对象,将该病毒所有蛋白基因克隆至pRK真核表达载体,并通过荧光素酶报告基因系统进行筛选,发现PB1蛋白(沉默PB1-F2基因)可以抑制RLR信号通路中IFN-β、ISRE和NF-κB启动子活化,并具有剂量依赖性.然后在HEK293细胞中过表达PB1蛋白及其它信号分子,利用双荧光素酶报告基因实验和qPCR实验证实PB1可抑制RLRs信号通路的活化,并确定其作用的靶点在TBK1上游,可能是MAVS；接着为了进一步确定PB1蛋白作用的靶分子,我们通过免疫共沉淀检测PB1与RLRs信号通路分子的相互作用,发现PB1特异性的结合MAVS,随后我们利用免疫印迹实验检测PB1蛋白对MAVS表达量的影响,发现PB1可以降低MAVS的表达量,具体降解机制正在研究中.因此,本研究的实验数据初步表明,H7N9 PB1蛋白可抑制RLRs信号通路的活化,且可以与MAVS相互作用,具有降低MAVS表达量的功能,研究结果明确了H7N9 IAV PB1蛋白在天然免疫信号通路中的作用靶点,为防控H7N9流感提供理论依据.
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