【摘 要】
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目的:建立具有激动样活性的抗α1肾上腺素受体抗体(α1-AA)的糖尿病大鼠模型,并观察该抗体对大鼠体重、心肌心肌组织TGF-β1和smad2/3、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原蛋白表达、心肌组织超微结构的变化.方法 用α1肾上腺素受体胞外第二肽段合成肽免疫糖尿病大鼠,采用α1-AA注射液100μg.100g-1于0、4、8、12、16周鼠尾静脉注射法对DM大鼠进行α1-AA免疫介导,采用酶联免疫吸附试验(En
【机 构】
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广州军区武汉总医院内分泌科 430070 广州军区武汉总医院医学实验科 430070
【出 处】
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中国微循环学会2014年全国学术会议
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目的:建立具有激动样活性的抗α1肾上腺素受体抗体(α1-AA)的糖尿病大鼠模型,并观察该抗体对大鼠体重、心肌心肌组织TGF-β1和smad2/3、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原蛋白表达、心肌组织超微结构的变化.方法 用α1肾上腺素受体胞外第二肽段合成肽免疫糖尿病大鼠,采用α1-AA注射液100μg.100g-1于0、4、8、12、16周鼠尾静脉注射法对DM大鼠进行α1-AA免疫介导,采用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法监测抗α1-AA阳性率;用光镜和电镜观察心脏病理变化,用免疫组织化学方法检测左心室心肌组织Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达;苦味酸-酸性品红(VG)染色,半定量分析大鼠心肌TGF-β1、smad2/3的表达结果:1)结果 在免疫介导17周,测介导组DMα1-AA阳性率62.9%(17/27)健康对照组仅10.0%,两组比较具有统计学意义(P<0.01).2) DM抗体阳性组大鼠心肌中Ⅰ型和Ⅲ型胶原高表达,明显高于抗体阴性组大鼠(P<0.05);3)电镜下抗体阳性组大鼠心肌损伤最严重.而DM抗体阴性组大鼠心肌病变较阳性组组明显减轻;4)VG染色测抗体阳性组大鼠心肌胶原纤维明显增多、排列紊乱,心肌胶原沉积较,而抗体阴性组大鼠心肌病变明显减轻.5)光学显微镜下观察左心室心肌smad2/3的SABC染色结果,抗体阳性组着色程度最深,呈强阳性改变,抗体阴性组大鼠呈弱阳性改变;6)半定量分析大鼠心肌TGF-β1、smad2/3的表达,抗体阳性组显著高于抗体阴性组(P<0.05)和健康对照组(P<0.01)结论:通过合成肽免疫介导的方法可以建立具激动样活性的抗α1肾上腺素受体抗体的大鼠模型,抗α1-AA介导可致糖尿病大鼠心肌损伤,免疫介导参与糖尿病心肌损害病理生理过程.
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