慢病毒载体转染后抗生素筛选至稳定转染合理流程的研究

来源 :中国医师协会美容与整形分会西南工作委员会成立大会暨首届西南美容与整形学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kaka3456
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  脂肪间充质干细胞是一类与骨髓间充质干细胞类似,具有成脂肪、骨细胞、软骨细胞、内皮细胞、神经细胞的多向分化潜功能。具有低免疫源性,在人体内储存丰富,获取简便创伤小。可作为本实验中慢病毒转染的靶细胞。第三代慢病毒载体可安全、有效感染靶细胞,长期稳定表达目的基因,现广泛应用于基因治疗及组织工程领域。然而,在应用过程中,对慢病毒稳定转染靶细胞并没有明确的标准流程,经过抗生素筛选的靶细胞仍会丢失目的基因。本实验就慢病毒转染后抗生素筛选至稳定株的具体流程设计实验,以抗生素筛选n次后的检测到的单克隆细胞作为稳定转染系,同时比较抗生素筛选一次后传代培养细胞与稳定转染系的目的基因的表达是否有区别。实验结果将提示是否有必要将单克隆细胞作为稳定转染的标准,为慢病毒转染后抗生素筛选提供规范。
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