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目的：建立反相HPLC-UV法同时测定人血浆及尿中头孢呋辛(CXM)和他唑巴坦(TZB)浓度.方法：采用Ultimate XB-C 18色谱柱(150×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.01mol\L\1 KH2PO4(12∶88,含0.04％三乙胺,以H3PO4调节pH至334),紫外检测波长TZB为220nm,CXM及内标咖啡酸为274nm.血浆及尿样均在酸性条件下用乙酸乙酯-重蒸乙醚(1∶2)二次萃取浓集后进样,以内标法定量.结果：血浆测定中CXM和TZB浓度分别在1～400 mg·L-1和0.5～200 mg·L-1范围内线性良好；萃取回收率分别为82.33％～90.18％和59.96％～67.80％；批内与批间RSD均小于9％；方法回收率分别为100.02％～105.63％和90.93％～94.96％.尿样中CXM和TZB浓度分别在5～2000 mg·L-1和2.5～1000 mg·L-1范围内线性良好；萃取回收率分别为51.92％～72.04％和50.05％～59.27％；批内与批间RSD均小于8％；方法回收率分别为98.05％～107.14％和99.14％～108.21％.结论：本方法快速简便,灵敏准确,可用于同时测定血浆及尿中CXM和TZB浓度,亦可用于药代动力学、生物利用度研究.