基因Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒TaqMan Real-Time PCR检测方法的建立及应用

来源 :2013年中国水产学会鱼病专业委员会学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aspnet2002web
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  目前国内己发现至少三种基因型的草鱼呼肠孤病毒(Grass Carp Reovirus,GCRV)存在,不同基因型之间GCRV编码蛋白存在较大差异.GCRV S6片段推测编码病毒主要外衣壳蛋白,在目前已发现的GCRV中普遍存在,同一基因型内具有高度的保守性.根据基因Ⅰ型GCRV的S6保守序列,分别设计扩增目的条带661bp普通引物(P1、Pz)、扩增目的条带159bp荧光定量引物(F1、F2)和一条探针;同时构建含有目的片段的PVAX-S6重组质粒作为标准质粒,10倍梯度稀释构建质粒拷贝数与CT值的标准曲线(Y=-3.389X+38.076).
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