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目的 鉴于内皮细胞中主要表达moesin及其在血管内皮细胞屏障功能下降和血管通透性升高中的促进作用,我们推测moesin蛋白可能参与高浓度S1P引起的血管通透性增加,所以本课题主要研究moesin磷酸化在高浓度S1P介导的内皮细胞屏障功能障碍中的作用。为进一步阐明高浓度S1P介导内皮细胞屏障功能损伤的作用机制提供实验依据,并为防治血管通透性增加提供新的思路和有效的手段。方法 S1P(10 μM)刺激脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs) 20 min,Western blot检测各组moesin磷酸化水平；用S1PR1/2/3拮抗剂分别预处理HUVECs 30 min后再用S1P刺激20 min,Western blot检测各组moesin磷酸化水平；应用siRNA技术下调moesin表达后,再用S1P(10 μM)刺激HUVECs 20 min用Western blot检测后各组moesin磷酸化水平、利用跨内皮细胞电阻(Transendothelial Electrical Resistance,TEER)检测下调moesin表达后对高浓度S1P介导的内皮细胞通透性的影响、对细胞进行免疫荧光染色后,采用激光扫描共聚焦显微镜观察下调moesin表达后对高浓度S1P介导的内皮细胞应力纤维形成情况。结果 高浓度S1P以时间依赖方式介导HUVECs moesin磷酸化,S1P介导moesin磷酸化具有剂量依赖性；S1PR2拮抗剂预处理HUVECs后可有效减少高浓度S1P介导的moesin磷酸化,而S1PR1/3拮抗剂则无此作用,结果提示高浓度S1P通过S1PR2介导moesin磷酸化；下调moesin表达后可减轻高浓度S1P介导的moesin磷酸化；下调moesin表达后可明显降低高浓度S1P介导的内皮细胞通透性增加及减少内皮细胞应力纤维形成。结论 S1P以时间依赖和剂量依赖的方式介导HUVECs moesin磷酸化；高浓度S1P通过S1PR2介导moesin磷酸化；Moesin磷酸化参与了高浓度S1P介导的内皮细胞屏障破坏作用。