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头孢他定(ceftazidime)为第三代头孢菌素类抗生素,结构式如图1,头孢他定对大多革兰阳性和阴性菌都有抗菌活性,曾为抗铜绿假单胞菌首选药物,且对β-内酰胺酶有较高稳定性,对肾脏基本无毒,因此在临床中较为常用.
文献报道采用反相离子对色谱法测定注射用头孢他定,该方法由于使用离子对试剂,实验中容易污染质谱仪,因此不适于质谱分析;而关于体液中的头孢他定测定的也有报道,主要是采用HPLC和胶束电动毛细管电泳(MEKC)方法,但此类方法的专属性及灵敏度有一定缺陷.虽然头孢类抗生素的质谱分析研究有过相关研究,而对于测定细菌培养液中的头孢他定未见有文献报道.单一的高效液相色谱分析无法排除细菌培养液中的基质干扰,影响细菌培养液中的头孢他定的含量测定.本实验建立了UFLC/MS-IT-TOF联用方法快速检测细菌培养液中的头孢他定,UFLC实现了各物质的快速分离,通过IT-TOF的高分辨及高质量精度功能,排除了其他杂质对头孢他定测定的干扰,并利用IT-TOF的多极质谱功能对头孢他定进行了结构确认,对其质谱裂解途径进行了探讨.同时本实验还考察了非产酶大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌对头孢他定的敏感性差异.