【摘 要】
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为了证实牛Mx1蛋白是否具有抗FMDV活性,本研究克隆了牛Mx1基因,构建了pcDNA3.1/bMxl真核表达载体,将真核表达载体转染BHK-21细胞,获得了稳定表达牛Mx1蛋白的重组BHK-21细胞株,并用100TCID50O型FMDV感染重组BHK-21细胞,通过实时荧光定量PCR测定攻毒后12h,24h,36h和48h,FMDVVP1基因的相对拷贝数和TCID50。结果:与阴性对照组细胞相比
【机 构】
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石河子大学动物科技学院, 新疆石河子832003
【出 处】
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第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会
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为了证实牛Mx1蛋白是否具有抗FMDV活性,本研究克隆了牛Mx1基因,构建了pcDNA3.1/bMxl真核表达载体,将真核表达载体转染BHK-21细胞,获得了稳定表达牛Mx1蛋白的重组BHK-21细胞株,并用100TCID50O型FMDV感染重组BHK-21细胞,通过实时荧光定量PCR测定攻毒后12h,24h,36h和48h,FMDVVP1基因的相对拷贝数和TCID50。结果:与阴性对照组细胞相比,表达牛Mx1蛋白的重组BHK-21细胞发生病变的时间延迟,细胞病变(CPE)减轻。在攻毒后12h,24h,36h和48h,FMDVVP1基因的相对表达量分别下降了45%,60%,25%,10%;TCIDsa测定结果显示,表达牛Mx1蛋白的重组BHK-21细胞TCIDso低于阴性对照细胞,中在攻毒后24h与阴性对照细胞差异显著,提示牛Mx1蛋白具有一定的抗FMDV活性。本研究为揭示牛Mx1蛋白抗FMDV作用的分子机制及抗FMDV家畜分子育种新材料的研发奠定了前期基础。
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