【摘 要】
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氟噻唑吡乙酮是美国杜邦公司研发的具有全新作用机制和化学结构的卵菌抑制剂，于2015年12月在我国获得登记，用于辣椒疫霉、致病疫霉和黄瓜霜霉等植物病原卵菌病害的防治.本课题组前期研究发现，室内药剂驯化获得的辣椒疫霉抗氟噻唑吡乙酮突变体中，其氧化固醇结合相关蛋白ORP1 (oxysterol binding protein-related protein 1)存在两类点突变：G770V和G839W.本
【机 构】
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中国农业大学植物病理学系,北京100193;西北农林科技大学植物病理学系,杨凌712100 中国农
【出 处】
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第十一届中国植物病害化学防治学术研讨会
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氟噻唑吡乙酮是美国杜邦公司研发的具有全新作用机制和化学结构的卵菌抑制剂，于2015年12月在我国获得登记，用于辣椒疫霉、致病疫霉和黄瓜霜霉等植物病原卵菌病害的防治.本课题组前期研究发现，室内药剂驯化获得的辣椒疫霉抗氟噻唑吡乙酮突变体中，其氧化固醇结合相关蛋白ORP1 (oxysterol binding protein-related protein 1)存在两类点突变：G770V和G839W.本研究通过CRISPR/Cas9定点编辑的方法，分别验证了两种点突变对辣椒疫霉抗药性水平和生物学性状的影响.结果 显示，具有点突变G770V和G839W的转化子均对氟噻唑吡乙酮表现出较高的抗性；包含G770V点突变的转化子表现出与野生型菌株BYA5相似的生物学表型，包括孢子囊产生和游动孢子的释放、休止孢的萌发和致病力等；具有G839W点突变的两株转化子均不能够产生孢子囊.上述两种类型点突变转化子的表型测定结果与课题组前期通过药剂驯化获得的突变体G770V和G839W的表型结果相反，初步推测卵菌遗传转化本身或CRISPR/Cas9可能存在潜在的脱靶效应导致G839W定点突变转化子不能够产生孢子囊，而G770V转化子具有与亲本菌株相当的生存适合度.本研究同时获得了一类ORP1点缺失(ΔN837)突变的辣椒疫霉转化子，其对氟噻唑吡乙酮表现出较高的抗性；大豆疫霉中相同位点缺失(PsORP1-ΔN837)也可导致对该药剂的抗性；具有ΔN837点缺失突变的两类疫霉转化子致病力均有所降低，但均能够致病.这些结果将有助于进一步揭示疫霉菌对氟噻唑吡乙酮的抗性机制，同时也为新型OSBPI类杀菌剂的开发提供重要参考.
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