【摘 要】
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目的：观察二甲基甲酰胺(DMF)致H9c2心肌细胞凋亡过程中胞浆p65、核内p65、总蛋白中p-IκB以及胞浆Cyt-c、Cleaved caspase-3、Bcl-2水平的变化,探讨DMF引起H9c2心肌细胞凋亡的可能机制.方法：体外培养的H9c2心肌细胞给予200mmol/L DMF染毒,Western Blotting法检测染毒0h、2h、4h、6h、8h、12h后胞浆p65、核内p65、总
【机 构】
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230032 安徽医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学 安徽国际旅行卫生保健中心
【出 处】
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第十四届全国劳动卫生与职业病学术会议
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目的：观察二甲基甲酰胺(DMF)致H9c2心肌细胞凋亡过程中胞浆p65、核内p65、总蛋白中p-IκB以及胞浆Cyt-c、Cleaved caspase-3、Bcl-2水平的变化,探讨DMF引起H9c2心肌细胞凋亡的可能机制.
方法：体外培养的H9c2心肌细胞给予200mmol/L DMF染毒,Western Blotting法检测染毒0h、2h、4h、6h、8h、12h后胞浆p65、核内p65、总蛋白中p-IκB的蛋白表达水平以及染毒0h、2h、4h、8h、12h、24h后胞浆Cyt-c、Cleaved caspase-3、Bcl-2的蛋白表达水平,免疫荧光细胞化学技术(IFC)对染毒不同时间后的细胞Cyt-c进行定位.
结果：与对照组相比,除12h组外,各组胞浆p65蛋白表达水平下降,核内p65蛋白表达水平上升,p-IκB蛋白表达水平上升,差异均有统计学意义(F值分别为7.77、33.11、90.25,P<0.01);其中,染毒12h时,胞浆p65水平较对照组略高,p-IκB水平较对照组略低,差异均无统计学意义(P>0.05).并且,与对照组相比,各组Cyt-c蛋白表达水平上升,Cleaved caspase-3蛋白表达水平上升,Bcl-2水平蛋白表达水平下降,差异均有统计学意义(F值分别为51.42、503.68、73.37,P<0.01);其中,染毒12h时,Cyt-c、Cleaved caspase-3、Bcl-2水平变化较大,与0h、2h、4h、8h组比较,差异均有统计学意义(P<0.01).另外,IFC对细胞Cyt-c检测显示,随着DMF染毒时间的延长,Cyt-c逐渐从线粒体释放到胞浆内.
结论：NF-κB信号通路与线粒体通路参与了DMF诱导的H9c2心肌细胞凋亡.
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