【摘 要】
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pUL23是HCMV LUL23基因编码的蛋白,目前其功能不详。研究发现外UL23能够与干扰素诱导蛋白相互作用,推测其可能与宿主细胞的免疫系统相关,HCMV能够逃避宿主免疫系统的攻击,而
【机 构】
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暨南大学生命科学技术学院生物工程系;
【基金项目】
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973项目:疱疹病毒潜伏机制的研究
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pUL23是HCMV LUL23基因编码的蛋白,目前其功能不详。研究发现外UL23能够与干扰素诱导蛋白相互作用,推测其可能与宿主细胞的免疫系统相关,HCMV能够逃避宿主免疫系统的攻击,而不被宿主细胞清除。成功培养Towne、Townedelul23两种病毒,感染使用IFN-γ处理的HFF细胞,收集病毒上清,测定病毒生长动力学曲线,结果表明,病毒蛋白编码pUL23蛋白能够抵抗γ干扰素的抗病毒作用。通过酵母双杂交技术从HEK293 cDNA文库筛选到与pUL23结合的宿主蛋白-Nmi,免疫共沉淀技术确定pUL23和Nmi在哺乳动物细胞能够相互作用、间接免疫荧光技术确定pUL23和Nmi共定位于细胞质。在宿主细胞过表达pUL23和病毒表达pUL23,使用IFN-γ诱导,通过萤光素酶活性实验发现pLUL23能够抑制IFN-γ依赖的转录活性,而未诱导情况下pUL23抑制效果不明显,pUL23抑制γ干扰素依赖的STAT1磷酸化。采用一个内源性Nmi表达低的细胞作为研究对象,在其中过表达pUL23和Nmi,使用IFN-γ诱导,使用免疫印迹的方法检测STAT1的磷酸化情况,用基因敲低的方法,将宿主细胞内源性表达的Nmi敲低,过表达pUL23,研究表明:pUL23能够抑制Nmi促进的IFN-γ诱导的STAT1磷酸化。
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