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目的:考察树枝状聚合物聚酰胺-胺(PAMAM) 对葛根素在角膜上皮(HCE)细胞毒性、摄取及渗透的影响,并对G4 PAMAM 的摄取机制进行研究。
方法:采用WST-8 法,考察了 PAMAM 短期细胞毒性、延迟细胞毒性以及与葛根素混合物的HCE 细胞毒性。建立HCE 细胞摄取以及渗透模型,比较了五种不同代数PAMAM 对葛根素HCE 细胞摄取和渗透的影响。采用流式细胞仪、扫描共聚焦显微镜对G4 PAMAM 摄取机制进行了初步研究。
结果:PAMAM 与HCE 细胞孵育30、60、90min 后显示细胞毒性呈时间、代数依赖关系,洗脱 PAMAM 后再孵育24h 未表现出延迟的细胞毒性。PAMAM 和葛根素的混合物未显示HCE 细胞毒性。整代PAMAM 可以明显促进HCE 细胞对葛根素的摄取,且呈现明显的代数、时间依赖关系,半代PAMAM 对葛根素HCE 细胞摄作用不明显。整代PAMAM 可以促进葛根素在HCE 细胞的渗透,促进作用依次为G4>G3>G5,半代PAMAM 对葛根素的HCE 细胞渗透没有影响。流式细胞术和共聚焦显微镜研究结果表明PAMAM 主要是被HCE 细胞摄取,而不是共轭连接于细胞表面。
结论:整代PAMAM 可促进葛根素在HCE 细胞的摄取及渗透。
方法:采用WST-8 法,考察了 PAMAM 短期细胞毒性、延迟细胞毒性以及与葛根素混合物的HCE 细胞毒性。建立HCE 细胞摄取以及渗透模型,比较了五种不同代数PAMAM 对葛根素HCE 细胞摄取和渗透的影响。采用流式细胞仪、扫描共聚焦显微镜对G4 PAMAM 摄取机制进行了初步研究。
结果:PAMAM 与HCE 细胞孵育30、60、90min 后显示细胞毒性呈时间、代数依赖关系,洗脱 PAMAM 后再孵育24h 未表现出延迟的细胞毒性。PAMAM 和葛根素的混合物未显示HCE 细胞毒性。整代PAMAM 可以明显促进HCE 细胞对葛根素的摄取,且呈现明显的代数、时间依赖关系,半代PAMAM 对葛根素HCE 细胞摄作用不明显。整代PAMAM 可以促进葛根素在HCE 细胞的渗透,促进作用依次为G4>G3>G5,半代PAMAM 对葛根素的HCE 细胞渗透没有影响。流式细胞术和共聚焦显微镜研究结果表明PAMAM 主要是被HCE 细胞摄取,而不是共轭连接于细胞表面。
结论:整代PAMAM 可促进葛根素在HCE 细胞的摄取及渗透。